本文關(guān)鍵詞：SM22α抑制Ras激活的機(jī)制及黃芩苷的靶向干預(yù)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cell, VSMC）的表型轉(zhuǎn)化是高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、血管再狹窄等血管重塑性疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵因素。血小板源性生長(zhǎng)因子（platelet-derived growth factor, PDGF）是VSMC的強(qiáng)效促絲裂原和趨化劑。黃芩苷（baicalin）是一種從中草藥中提取的草本衍生的黃酮類化合物。已有研究發(fā)現(xiàn)，黃芩苷具有抑制VSMC增殖的作用。平滑肌22alpha (smooth muscle22alpha, SM22α)是收縮型VSMC的分化標(biāo)志基因，，具有抗增殖功能。Ras蛋白是原癌基因ras表達(dá)的一種小G蛋白，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、細(xì)胞骨架、蛋白質(zhì)分泌和運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程的調(diào)節(jié)。我們前期發(fā)現(xiàn)，黃芩苷抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMC增殖，本研究進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。 方法與結(jié)果： 1黃芩苷抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMC表型轉(zhuǎn)化 PDGF-BB（20ng/ml）刺激VSMC24h后，Western blot結(jié)果顯示，PDGF-BB明顯促進(jìn)VSMC增殖標(biāo)志物PCNA的表達(dá)，抑制VSMC分化標(biāo)志物SM22α、caldesmon、calponin、SM α-actin的表達(dá)。 用黃芩苷預(yù)處理VSMC24h后，再用PDGF-BB刺激VSMC24h，Western blot結(jié)果顯示，黃芩苷抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的PCNA上調(diào)和分化基因SM22α、caldesmon、calponin、SM α-action下調(diào)。結(jié)果提示，黃芩苷抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMC表型轉(zhuǎn)化。 2SM22α通過(guò)與Ras相互作用抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的SOS1-Ras信號(hào)復(fù)合物形成 SOS1與Ras的相互作用是Ras活化的重要步驟。用PDGF-BB刺激平滑肌細(xì)胞2min后，進(jìn)行免疫沉淀分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)PDGF-BB促使SOS1與Ras的相互作用，而過(guò)表達(dá)SM22α則競(jìng)爭(zhēng)抑制SOS1與Ras的結(jié)合。結(jié)果提示，SM22α可能通過(guò)與Ras結(jié)合而阻止SOS1-Ras信號(hào)復(fù)合物的形成，進(jìn)而抑制Ras活化。 3SM22α磷酸化突變體促進(jìn)SOS1和Ras的相互作用 免疫沉淀分析結(jié)果顯示，過(guò)表達(dá)SM22α非磷酸化突變體S181A抑制Ras與SOS1的結(jié)合，與野生型SM22α作用一致；而過(guò)表達(dá)SM22α強(qiáng)制磷酸化的S181D突變體，則促進(jìn)Ras-SOS1復(fù)合物結(jié)合。這些結(jié)果佐證了上述發(fā)現(xiàn)。 4黃芩苷抑制球囊損傷誘導(dǎo)的ICAM-1和VCAM-1表達(dá)和內(nèi)膜增生 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，球囊損傷14d后，與損傷組相比較，黃芩苷顯著抑制球囊損傷誘導(dǎo)的ICAM-1和VCAM-1表達(dá)。 結(jié)論： 1黃芩苷抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的VSMC由分化型向合成型轉(zhuǎn)化。 2過(guò)表達(dá)SM22α抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的Ras-SOS1信號(hào)復(fù)合物的形成。 3SM22α磷酸化突變體促進(jìn)SOS1-Ras信號(hào)復(fù)合物的形成。 4黃芩苷抑制球囊損傷誘導(dǎo)的ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)和內(nèi)膜增生。
【關(guān)鍵詞】：血管平滑肌細(xì)胞 黃芩苷 SM22α 小G蛋白
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329;R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-9
• 材料與方法9-13
• 結(jié)果13-15
• 附圖15-19
• 討論19-21
• 結(jié)論21
• 參考文獻(xiàn)21-23
• 綜述 金屬基質(zhì)蛋白酶在 VSMC 遷移、增殖和凋亡中的作用23-37
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 致謝37-38
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷38

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張秀真,吳澤志;細(xì)胞偽足形成與微絲骨架研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè);2005年04期

2 呼海娟;韓梅;孫榮華;劉彬;溫進(jìn)坤;;黃芩苷抑制大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖和新生內(nèi)膜肥厚[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年12期

  本文關(guān)鍵詞：SM22α抑制Ras激活的機(jī)制及黃芩苷的靶向干預(yù)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：503927