布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白BspB的原核表達(dá)及布魯氏菌免疫逃逸分析
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【摘要】:目的克隆并表達(dá)布魯氏菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)效應(yīng)蛋白BspB并推測(cè)其免疫逃逸機(jī)制。方法以羊種布魯氏菌16M基因組為模板,利用PCR擴(kuò)增布魯氏菌分泌蛋白BspB(BAB1-0712)基因,連接pMD19-T載體后測(cè)序,將測(cè)序正確的基因片段經(jīng)雙酶切后克隆至pET-30a載體中,轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),通過(guò)SDS-PAGE和Western blot分析鑒定表達(dá)產(chǎn)物。結(jié)果成功克隆了BspB基因,片段大小為564bp;SDS-PAGE檢測(cè),BspB蛋白分子質(zhì)量單位約為27.5ku;Western blot分析顯示,BspB蛋白均可被布魯氏菌陽(yáng)性血清識(shí)別。該蛋白測(cè)序后與先天性免疫分子IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4、SIGIRR比對(duì),具有一定的同源性。結(jié)論重組蛋白BspB具有免疫反應(yīng)原性,可作為候選診斷抗原;由于其序列與IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4及SIGIRR有一定同源性,BspB可能在布魯氏菌感染宿主過(guò)程中發(fā)揮免疫逃逸的作用。
【作者單位】: 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;銅仁學(xué)院生物與農(nóng)林工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 布魯氏菌 效應(yīng)蛋白 Ⅳ型分泌系統(tǒng) 原核表達(dá) 免疫逃逸
【基金】:杰出青年科技人才培育計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013ZRKXJQ06) 高層次人才科研啟動(dòng)資金專(zhuān)項(xiàng)(No.RCZX201228) 博士科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(No.trxyDH1504)
【分類(lèi)號(hào)】:R378.5
【正文快照】: [Journal of Pathogen Biology.2015Sep;10(9):778-781,815.]Prokaryotic expression of BspB protein of the type IV secretion system of Brucella and analysis of im-mune evasion by Brucella于宿主細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞、滋養(yǎng)層細(xì)胞、上皮細(xì)胞等)內(nèi),并且能夠在宿
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1 Q
本文編號(hào):503585
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