低氧有助于小鼠骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞的定向分化
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【摘要】:目的本研究在測(cè)量小鼠體內(nèi)股骨骨髓正常氧分壓的基礎(chǔ)上設(shè)定相應(yīng)的體外低氧濃度(3%),研究低氧環(huán)境對(duì)小鼠骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞系定向分化功能的影響。方法用微電極測(cè)量正常小鼠股骨骨髓的氧分壓,并以此為依據(jù)設(shè)定體外培養(yǎng)的低氧濃度。將小鼠骨髓源單個(gè)核細(xì)胞置于3%(低氧)和20%(常氧)氧濃度下用內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基(EGM-2)進(jìn)行定向誘導(dǎo)分化培養(yǎng),培養(yǎng)至第2代進(jìn)行Dil-Ac-LDL攝取實(shí)驗(yàn)和FITC-UEA結(jié)合實(shí)驗(yàn)雙染色鑒定。對(duì)3%和20%氧濃度下培養(yǎng)的內(nèi)皮樣細(xì)胞用MTT法進(jìn)行增生能力的鑒定;用熒光染色法對(duì)其進(jìn)行黏附能力的比較。結(jié)果小鼠股骨骨髓生理性氧分壓濃度為(21.55±3.40)mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa),相當(dāng)于(2.8±0.45)%氧體積分?jǐn)?shù)(約為3%)。在不同氧濃度下培養(yǎng)的細(xì)胞,DilAc-LDL攝取實(shí)驗(yàn)和FITC-UEA結(jié)合實(shí)驗(yàn)均為陽性。。MTT細(xì)胞增生實(shí)驗(yàn)顯示低氧(3%)培養(yǎng)的細(xì)胞吸光度為0.31±0.05,常氧(20%)培養(yǎng)的細(xì)胞吸光度為0.16±0.01(P0.01,n=5)。低氧培養(yǎng)的細(xì)胞,其黏附率為(8.72±2.95)%,常氧培養(yǎng)的內(nèi)皮樣細(xì)胞,其黏附率為(3.91±0.72)%(P0.05,n=5)。結(jié)論 3%的氧濃度是骨髓生理狀態(tài)下的氧濃度。在此濃度下,骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞可被誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮樣細(xì)胞。與常氧相比,低氧培養(yǎng)的內(nèi)皮樣細(xì)胞具有較高的增生和黏附能力。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院血管外科;首都醫(yī)科大學(xué)血管外科研究所;首都醫(yī)科大學(xué)血管外科學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】: 氧分壓 間充質(zhì)干細(xì)胞 低氧
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(2012AA020507) 首都臨床特色應(yīng)用研究(Z121107001012069) 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)臨床合作課題(12JL29)~~
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 在體內(nèi)和體外,氧分子都是細(xì)胞生長的代謝底物,也是一個(gè)重要的信號(hào)分子。而其在體外對(duì)于干細(xì)胞自我更新分化及其他重要功能的影響仍缺乏全面的認(rèn)識(shí)。近年研究[1]發(fā)現(xiàn),氧分子能夠影響多種前體細(xì)胞的基本特性,低氧在血管生成中起到重要的調(diào)節(jié)作用。研究者們將骨髓源間充質(zhì)干細(xì)胞
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本文編號(hào):502273
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