shRNA抑制survivin基因表達(dá)對(duì)臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與凋亡的影響
本文關(guān)鍵詞:shRNA抑制survivin基因表達(dá)對(duì)臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與凋亡的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的研究靶向存活素(survivin)的短發(fā)夾RNA真核表達(dá)質(zhì)粒(shRNA)對(duì)臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與凋亡的影響。方法合成靶向survivin的shRNA真核表達(dá)質(zhì)粒及陰性對(duì)照質(zhì)粒,用脂質(zhì)體法將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至經(jīng)VEGF(50ng/mL)處理的HUVEC細(xì)胞;轉(zhuǎn)染48h后,采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和蛋白印跡法檢測(cè)HUVEC中survivin的mRNA表達(dá)及蛋白水平。四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖;TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果(1)survivin-shRNA質(zhì)粒試驗(yàn)組與陰性對(duì)照shRNA質(zhì)粒組及空白對(duì)照組比較,轉(zhuǎn)染48h后人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞survivin的mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯下降(P0.05)。(2)與陰性對(duì)照shRNA組及空白對(duì)照組比較,轉(zhuǎn)染后的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力明顯下降。轉(zhuǎn)染后24、48、72h生長(zhǎng)抑制率分別為(13.53±3.91)%、(38.97±1.82)%、(65.75±1.83)%,于轉(zhuǎn)染后72h最為顯著。(3)試驗(yàn)組凋亡率為(28.07±1.71)%,較陰性對(duì)照組(11.45±1.52)%和空白對(duì)照組(10.04±1.46)%顯著增高(P0.05)。結(jié)論靶向survivin的shRNA質(zhì)粒能通過(guò)下調(diào)survivin表達(dá),進(jìn)而抑制人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡。
【作者單位】: 云南省第一人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科;
【關(guān)鍵詞】: 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 存活素 shRNA 增殖 細(xì)胞凋亡
【基金】:云南省科技廳昆明醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合專(zhuān)項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(2011FB215)
【分類(lèi)號(hào)】:R329.2;Q78
【正文快照】: 存活素(survivin)是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosisof protein,IAP)家族成員,是具有強(qiáng)大抗凋亡效應(yīng)的蛋白[1]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEFG)可誘導(dǎo)survivin抗凋亡蛋白的表達(dá),抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,促進(jìn)血管生成[2]。深入認(rèn)識(shí)和揭示survivin在
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本文關(guān)鍵詞:shRNA抑制survivin基因表達(dá)對(duì)臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與凋亡的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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