本文關(guān)鍵詞：左旋丁苯酞對(duì)血管性癡呆模型小鼠海馬細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：以C57Bl/6小鼠為研究對(duì)象，觀察左旋丁苯酞對(duì)血管性癡呆(Vascular Dementia，VaD)模型小鼠海馬細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響。 方法：本研究分為三部分。 以雄性C57Bl/6小鼠為研究對(duì)象，采用反復(fù)三次結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈的方法，給予腦缺血20min(ischemia，I)-再灌注10min(reperfusion，R)處理，建立VAD小鼠模型，灌胃(ig)給予l-NBP，每日1次，分為5組，每組15只，分別為對(duì)照組、模型組、預(yù)防組：術(shù)前預(yù)防給藥7d(l-NBP30mg/kg)，低劑量治療組：術(shù)后給藥28d(l-NBP30mg/kg)和高劑量預(yù)防組：術(shù)后給藥28d(l-NBP60mg/kg)。在模型制備后的第29天利用Morris水迷宮試驗(yàn)進(jìn)行學(xué)習(xí)和空間記憶能力的測(cè)試，模型組和模型組各取一只小鼠，灌注取材，留取胼胝體標(biāo)本行電鏡觀察；硫堇染色觀察海馬組織病理學(xué)變化；用免疫組織化學(xué)法以及Western-blot檢測(cè)小鼠海馬組織中的Bcl-2、Bax的蛋白表達(dá)；PCR檢測(cè)小鼠海馬組織中Bcl-2、Bax的mRNA水平。 結(jié)果： 1Morris水迷宮試驗(yàn)結(jié)果 1.1學(xué)習(xí)能力結(jié)果 1.1.1第一天各組學(xué)習(xí)成績(jī)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 1.1.2第二天，模型組與模型組相比時(shí)間略有延長(zhǎng)(P0.05)，低劑量治療組比模型組時(shí)間減少(P0.05)。 1.1.3第三天，低劑量治療組比模型組上臺(tái)時(shí)間減少(P0.05)。 1.1.4第四天，模型組，低劑量治療組，預(yù)防組均較模型組上臺(tái)時(shí)間縮短，小鼠學(xué)習(xí)能力趨于穩(wěn)定。 1.1.5第五天，模型組，低劑量治療組，高劑量治療組，預(yù)防組均較模型組上臺(tái)時(shí)間縮短，其中以高劑量治療組和預(yù)防組的上臺(tái)平均時(shí)間最短。 1.2記憶能力結(jié)果 1.2.1第四象限時(shí)間（%） 模型組以及預(yù)防組在第四象限停留的時(shí)間比模型顯著延長(zhǎng)（(P0.05）。 2電鏡結(jié)果 2.1對(duì)照組 胼胝體區(qū)內(nèi)血管壁光滑，血管內(nèi)皮細(xì)胞排列緊湊；髓鞘排列規(guī)則、緊密，未見(jiàn)脫髓鞘改變。 2.2模型組 血管壁粗糙、增厚，彈力膜中斷，彈力纖維、膠原纖維增生，基膜及基板不完整�？梢�(jiàn)神經(jīng)纖維不同程度的退行性改變，髓鞘的正常紋理不清，結(jié)構(gòu)紊亂。 3硫堇染色結(jié)果 3.1對(duì)照組 海馬CA1區(qū)神經(jīng)元排列整齊、致密，細(xì)胞形態(tài)完整、邊界清晰，，胞核大而圓、核仁清晰。神經(jīng)元計(jì)數(shù)為203.53±11.04。 3.2模型組 在海馬CA1區(qū)可觀察到部分神經(jīng)元死亡，存在斷裂帶，殘存的神經(jīng)元胞體皺縮，形態(tài)不規(guī)則，胞核固縮、濃染，核仁不清或消失。神經(jīng)元計(jì)數(shù)為69.23±2.14。同模型組相比P0.05。 3.3低劑量治療組 海馬CA1區(qū)細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組少，較模型組略多，細(xì)胞形態(tài)完整，邊界清晰，僅見(jiàn)個(gè)別錐體細(xì)胞核固縮，減少。神經(jīng)元計(jì)數(shù)為114.92±2.08。同模型組相比P0.05。 3.4高劑量治療組 神經(jīng)元排列整齊、致密，胞核飽滿、核仁較清晰，無(wú)明顯的細(xì)胞缺失。神經(jīng)元計(jì)數(shù)189.92±3.18。同模型組相比P0.05. 3.5預(yù)防組 大體觀察同高劑量治療組，神經(jīng)元計(jì)數(shù)199.92±2.96同模型組相比P0.05。 4Bcl-2/Bax蛋白及mRNA水平 4.1免疫組化以及Western-blot結(jié)果均顯示模型組較模型組Bcl-2/Bax降低，而應(yīng)用丁苯酞干預(yù)組雖在趨勢(shì)上顯示Bcl-2/Bax升高，但不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.2PCR的結(jié)果示：5組數(shù)據(jù)沒(méi)有顯著地升與降的趨勢(shì)。 結(jié)論： 1通過(guò)應(yīng)用電鏡技術(shù)對(duì)胼胝體超微結(jié)構(gòu)的觀察以及經(jīng)Morris水迷宮試驗(yàn)的行為學(xué)測(cè)試，證實(shí)了本研究的VaD模型制造成功，此模型小鼠存在學(xué)習(xí)和記憶功能障礙，并且預(yù)防性應(yīng)用左旋丁苯酞可以顯著降低血管性癡呆的發(fā)生與發(fā)展。 2左旋丁苯酞治療組和預(yù)防組的神經(jīng)元均較模型組有增多。左旋丁苯酞可以逆轉(zhuǎn)VaD小鼠海馬組織病理學(xué)變化，進(jìn)而改善其學(xué)習(xí)和記憶能力。 3在本實(shí)驗(yàn)的5組中，模型組中Bcl-2/Bax降低，而左旋丁苯酞干預(yù)組雖有數(shù)據(jù)上的變化，但不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，反復(fù)腦缺血再灌注后激活了細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax，阻止了神經(jīng)元的凋亡，而這一途徑不是左旋丁苯酞發(fā)揮其治療血管性癡呆的主要機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：血管性癡呆 C57Bl/6小鼠 海馬 Bcl-2 Bax
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R-332;R749.1
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 引言12-13
• 第一部分 血管性癡呆小鼠模型的建立、術(shù)后行為學(xué)測(cè)定及海馬病理學(xué)變化13-26
• 前言13
• 材料與方法13-18
• 結(jié)果18-19
• 附圖19-22
• 附表22-23
• 討論23-24
• 小結(jié)24-25
• 參考文獻(xiàn)25-26
• 第二部分 觀察應(yīng)用左旋丁苯酞后血管性癡呆小鼠海馬的病理學(xué)變化26-33
• 前言26
• 材料與方法26-28
• 結(jié)果28-29
• 附圖29-30
• 附表30-31
• 討論31
• 小結(jié)31-32
• 參考文獻(xiàn)32-33
• 第三部分 觀察應(yīng)用左旋丁苯酞后血管性癡呆小鼠海馬組織 Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的變化33-51
• 前言33
• 材料與方法33-41
• 結(jié)果41-42
• 附圖42-45
• 附表45-46
• 討論46-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 結(jié)論51-52
• 綜述一 全腦低灌注型血管性認(rèn)知功能障礙動(dòng)物模型制作方法52-61
• 參考文獻(xiàn)58-61
• 綜述二 缺血致血管性癡呆與細(xì)胞凋亡的研究61-67
• 參考文獻(xiàn)65-67
• 致謝67-68
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷68

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 余芬;章軍建;;慢性腦缺血大鼠海馬中APE的表達(dá)與神經(jīng)元凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2006年04期

2 姚國(guó)恩,王景周,陳曼娥;雙側(cè)頸、椎動(dòng)脈阻斷大鼠血管性癡呆模型的評(píng)價(jià)[J];重慶醫(yī)學(xué);2003年03期

3 張海寧;孫莉;湯躍宇;王明宇;吳江;;腦脈泰對(duì)慢性腦缺血致血管性癡呆大鼠腦血流量及海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2009年04期

4 劉春嶺;劉玉府;李昕;渠文生;張芳芳;王建平;;雌激素對(duì)血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能、海馬Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)及神經(jīng)元凋亡的影響[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2009年06期

5 謝道俊;江停戰(zhàn);汪遠(yuǎn)金;胡業(yè)彬;李之和;黃為;尹良勝;劉妮;曹士健;陳永華;;黃蒲通竅膠囊對(duì)血管性癡呆大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡Fas/FasL蛋白表達(dá)的影響[J];中國(guó)臨床保健雜志;2007年06期

6 馬桂賢;王麗娟;;血管性認(rèn)知障礙的分子機(jī)制和遺傳學(xué)[J];國(guó)際腦血管病雜志;2006年11期

7 王杰;程言博;印曉星;;銀杏葉提取物對(duì)6-OHDA誘導(dǎo)PC12細(xì)胞Bax和Bcl-2表達(dá)的影響[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年04期

8 閻超華,馮亦璞;丁基苯酞對(duì)低糖低氧誘導(dǎo)的大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);1998年07期

9 陳粲;楊瓊;戴桃李;潘婭;王旭東;張敏;;穴位埋線與VD模型大鼠記憶障礙及海馬Caspase-3表達(dá)的關(guān)系[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2009年20期

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本文編號(hào)：462917