表達(dá)結(jié)核桿菌ppe27基因重組恥垢桿菌的構(gòu)建及鑒定
發(fā)布時(shí)間:2017-06-16 18:11
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【摘要】:采用PCR技術(shù)擴(kuò)增出結(jié)核分枝桿菌ppe27基因,并克隆至穿梭質(zhì)粒pMV261中,將重組pMV261-ppe27-flag穿梭表達(dá)載體電轉(zhuǎn)化到恥垢分枝桿菌內(nèi),誘導(dǎo)重組恥垢分枝桿菌,通過免疫印跡分析表達(dá)產(chǎn)物。結(jié)果表明:成功構(gòu)建表達(dá)結(jié)核分枝桿菌基因ppe27的重組恥垢分枝桿菌,Western blotting結(jié)果顯示,表達(dá)的重組融合蛋白PPE27-FLAG能與抗FLAG多抗以及兔抗PPE27-HIS蛋白多抗發(fā)生特異反應(yīng),在37.9ku處有明顯特異性條帶。表達(dá)ppe27基因的重組恥垢分枝桿菌構(gòu)建成功,為下一步研究結(jié)核分枝桿菌致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)江蘇省人獸共患病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/江蘇省重要?jiǎng)游镆卟∨c人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】: 結(jié)核分枝桿菌 ppe基因 恥垢分枝桿菌 表達(dá)
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(973-2012CB518805) 國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31201882) 江蘇省高校自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(12KJB230001)
【分類號(hào)】:R378.911
【正文快照】: 結(jié)核病(TB)是由結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)引起的一種以呼吸系統(tǒng)感染為主的慢性傳染病。目前全球約有1/3的人口感染結(jié)核桿菌,絕大多數(shù)是以潛伏感染的形式存在[1]。1998年結(jié)核分枝桿菌基因組測序完成[2],發(fā)現(xiàn)了PE和PPE兩大富含甘氨酸的蛋白家
【相似文獻(xiàn)】
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1 徐苗,陳保文,沈小兵,蘇城,羅永艾,王國治;恥垢分枝桿菌作為免疫調(diào)節(jié)劑的研究[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2005年09期
2 湛W歐,
本文編號(hào):456107
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