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膜聯(lián)蛋白A2在肝肺綜合癥大鼠血清致肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2017-06-16 04:02

  本文關(guān)鍵詞:膜聯(lián)蛋白A2在肝肺綜合癥大鼠血清致肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景與目的:肝肺綜合癥(hepatopulmonary syndrome,HPS)是慢性肝病導(dǎo)致肺微血管病變引起動脈血氧合障礙的一種綜合病征。肺血管重塑是肺微血管病變的主要病理變化,尋找調(diào)控HPS肺血管重塑的靶蛋白是目前研究的重點。膜聯(lián)蛋白A2(annexin A2,ANXA2)是鈣依賴的磷脂結(jié)合蛋白超家族成員,參與調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的分化、增殖、遷移和凋亡,在多個生命過程中發(fā)揮重要作用。本研究擬探討ANXA2在HPS大鼠血清致肺動脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖中的作用,為闡明HPS肺血管重塑的分子機(jī)制及其防治提供依據(jù)。方法:原代培養(yǎng)大鼠PASMCs并鑒定后,隨機(jī)分為2組:對照組(C組)和HPS組,分別用正常大鼠血清培養(yǎng)C組PASMCs,HPS大鼠血清培養(yǎng)HPS組PASMCs,兩組PASMCs于血清中孵育24、48、72h。采用氚-胸腺嘧啶核苷摻入法(3H-TdR)、噻唑藍(lán)比色法(MTT)檢測大鼠PASMCs增殖變化,分別用RT-PCR和western blot檢測大鼠PASMCs中ANXA2mRNA及其蛋白表達(dá)含量變化;運用RNA干擾(RNAinterference,RNAi)技術(shù)將ANXA2基因沉默,觀察對HPS大鼠血清致PASMCs增殖的影響,并用western blot檢測ERK1/2、NF-κB磷酸化水平。結(jié)果:HPS組PASMCs在血清孵育24、48、72h的3H-TdR以及MTT檢測值明顯高于C組各時間點,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且隨大鼠血清作用時間延長,HPS組PASMCs3H-TdR以及MTT檢測值增加更為明顯;兩組均檢測出ANXA2mRNA及其蛋白的表達(dá),但與C組比較,HPS組PASMCs內(nèi)ANXA2mRNA及其蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),且隨時間延長,表達(dá)量增加更明顯。siRNA下調(diào)ANXA2表達(dá)后,再經(jīng)HPS大鼠血清孵育,PASMCs MTT以及3H-TdR摻入量明顯低于對照組(P0.05)。與C組比較,,HPS大鼠血清可致ERK1/2、NF-κB磷酸化水平明顯升高(P0.05);而下調(diào)ANXA2表達(dá)后,HPS大鼠血清致ERK1/2、NF-κB磷酸化明顯低于對照組(P0.05)。結(jié)論:HPS大鼠血清可致PASMCs異常增殖;HPS大鼠血清通過ANXA2介導(dǎo)促增殖信號ERK1/2、NF-κB活性改變可能是PASMCs異常增殖的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】:增殖 肺動脈平滑肌細(xì)胞 膜聯(lián)蛋白A2 肝肺綜合癥
【學(xué)位授予單位】:瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R363
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-9
  • 前言9-11
  • 第一部分 HPS 大鼠血清對 PASMCs 增殖以及對 ANXA2 表達(dá)的影響11-28
  • 材料與方法12-22
  • 結(jié)果22-26
  • 討論26-28
  • 第二部分 下調(diào) PASMCsANXA2 表達(dá)實驗研究28-36
  • 材料與方法29-31
  • 結(jié)果31-34
  • 討論34-36
  • 第三部分 下調(diào) ANXA2 表達(dá)對 HPS 大鼠血清致 PASMCs 增殖以及下游 ERK1/2、NF-κB 活性的影響36-44
  • 材料與方法37-38
  • 結(jié)果38-41
  • 討論41-44
  • 全文結(jié)論44-45
  • 參考文獻(xiàn)45-49
  • 英漢縮略詞對照表49-50
  • 致謝50-51
  • 綜述51-63
  • 參考文獻(xiàn)59-63
  • 研究生期間發(fā)表的論文63-64

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 倪曉光;趙平;王貴齊;;膜聯(lián)蛋白A1的結(jié)構(gòu)和功能及其與惡性腫瘤的關(guān)系[J];癌癥進(jìn)展;2010年01期

2 陶曉倩;王大勇;柳海燕;林釵英;韓雪峰;時姍姍;崔英霞;戈一峰;姚兵;;膜聯(lián)蛋白5對大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌及3β-羥基類固醇脫氫酶表達(dá)的影響[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2010年04期

3 國斌;易斌;魯開智;;哺乳動物雷帕霉素靶蛋白的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2010年08期

4 章藹然;潘寧;侯穎春;;膜聯(lián)蛋白A2與惡性腫瘤發(fā)展進(jìn)程的關(guān)系[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2008年03期


  本文關(guān)鍵詞:膜聯(lián)蛋白A2在肝肺綜合癥大鼠血清致肺動脈平滑肌細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:454308

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