本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用組織特異性分子的保守序列鑒定人源細胞的組織來源，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立一種有效簡便經(jīng)濟的檢測方法,用于鑒定培養(yǎng)細胞的組織來源,對新鮮取材細胞歸類,檢測細胞組織來源。方法根據(jù)文獻報道與NCBI數(shù)據(jù)庫,設(shè)計17對組織特異性相關(guān)引物,分別針對16個常見的人類組織特異性因子的mRNA保守序列,培養(yǎng)細胞,提取mRNA,反轉(zhuǎn)錄為c DNA,以此為模板進行PCR,瓊脂糖凝膠電泳分析;對這些引物進行特異性和敏感性的篩選;其中8對引物可用于判斷人類組織特異性,以雙盲實驗對此方法進行驗證,用于鑒定人類細胞的組織來源。結(jié)果 17對組織特異性相關(guān)引物中,特異性分子ALB、AFP、SYN、CDH16、SFTPB、LCA、FLT和MUL2的對應(yīng)引物可有效應(yīng)用于鑒定細胞是否源自肝、腎、神經(jīng)、肺、造血、內(nèi)皮和分泌組織;特異性因子PSA對應(yīng)引物可廣泛在人類各組織細胞中擴增出條帶;鑒定其他組織的引物有待進一步研究完善優(yōu)化。結(jié)論應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)擴增編碼組織特異性分子mRNA的保守序列可以準確鑒定待檢測細胞的組織來源。本研究為鑒定常見細胞的組織來源提供新方法。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院病理學(xué)系細胞資源中心;
【關(guān)鍵詞】： 組織特異因子 細胞 組織起源
【基金】：國家細胞資源共享平臺基金(2013)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 體外培養(yǎng)的實驗細胞資源是目前醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛、最重要的實驗工具之一,使用背景清楚的細胞是實驗可靠的關(guān)鍵。尤其是人類細胞用于發(fā)病機制研究及藥物研發(fā),要求往往更為嚴格。被交叉污染細胞的使用,雖然很早已被認識,但近年來隨著實驗細胞的更廣泛應(yīng)用,其擴大的

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  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用組織特異性分子的保守序列鑒定人源細胞的組織來源，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：446779