本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用組織特異性分子的保守序列鑒定人源細(xì)胞的組織來源，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立一種有效簡便經(jīng)濟(jì)的檢測方法,用于鑒定培養(yǎng)細(xì)胞的組織來源,對新鮮取材細(xì)胞歸類,檢測細(xì)胞組織來源。方法根據(jù)文獻(xiàn)報道與NCBI數(shù)據(jù)庫,設(shè)計17對組織特異性相關(guān)引物,分別針對16個常見的人類組織特異性因子的mRNA保守序列,培養(yǎng)細(xì)胞,提取mRNA,反轉(zhuǎn)錄為c DNA,以此為模板進(jìn)行PCR,瓊脂糖凝膠電泳分析;對這些引物進(jìn)行特異性和敏感性的篩選;其中8對引物可用于判斷人類組織特異性,以雙盲實(shí)驗(yàn)對此方法進(jìn)行驗(yàn)證,用于鑒定人類細(xì)胞的組織來源。結(jié)果 17對組織特異性相關(guān)引物中,特異性分子ALB、AFP、SYN、CDH16、SFTPB、LCA、FLT和MUL2的對應(yīng)引物可有效應(yīng)用于鑒定細(xì)胞是否源自肝、腎、神經(jīng)、肺、造血、內(nèi)皮和分泌組織;特異性因子PSA對應(yīng)引物可廣泛在人類各組織細(xì)胞中擴(kuò)增出條帶;鑒定其他組織的引物有待進(jìn)一步研究完善優(yōu)化。結(jié)論應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增編碼組織特異性分子mRNA的保守序列可以準(zhǔn)確鑒定待檢測細(xì)胞的組織來源。本研究為鑒定常見細(xì)胞的組織來源提供新方法。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院病理學(xué)系細(xì)胞資源中心;
【關(guān)鍵詞】： 組織特異因子 細(xì)胞 組織起源
【基金】：國家細(xì)胞資源共享平臺基金(2013)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 體外培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源是目前醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛、最重要的實(shí)驗(yàn)工具之一,使用背景清楚的細(xì)胞是實(shí)驗(yàn)可靠的關(guān)鍵。尤其是人類細(xì)胞用于發(fā)病機(jī)制研究及藥物研發(fā),要求往往更為嚴(yán)格。被交叉污染細(xì)胞的使用,雖然很早已被認(rèn)識,但近年來隨著實(shí)驗(yàn)細(xì)胞的更廣泛應(yīng)用,其擴(kuò)大的

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  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用組織特異性分子的保守序列鑒定人源細(xì)胞的組織來源，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：446779