發(fā)布時間：2017-06-11 14:09

  本文關(guān)鍵詞：粉塵螨1類變應(yīng)原T細(xì)胞表位重組蛋白的構(gòu)建及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建Der f1的T細(xì)胞表位融合肽基因的原核表達(dá)載體并表達(dá)鑒定。方法利用基因工程方法構(gòu)建Der f1的T細(xì)胞表位融合肽嵌合基因,命名為Der f1T,并插入到原核表達(dá)載體p ET28a(+)中,形成重組原核表達(dá)載體p ET28a(+)-Der f1T,進(jìn)行雙酶切和測序驗(yàn)證后的陽性克隆轉(zhuǎn)化到E.coli BL21(DE3)誘導(dǎo)其表達(dá)。制樣進(jìn)行SDS-PAGE分析表達(dá)產(chǎn)物,再進(jìn)行純化,并Western bloting鑒定表達(dá)的蛋白。ELISA法測定重組蛋白對粉塵螨過敏的患者血清Ig E抗體的結(jié)合能力。結(jié)果雙酶切和測序結(jié)果說明原核表達(dá)載體p ET28a(+)-Der f1T構(gòu)建成功;SDS-PAGE說明Der f1T誘導(dǎo)且純化成功;Western bloting進(jìn)一步說明Der f1T蛋白純化成功;ELISA試驗(yàn)結(jié)果說明Der f1T對粉塵螨過敏的患者血清中Ig E結(jié)合能力與Der f1相比明顯下降(P0.05)。結(jié)論成功表達(dá)Der f1的T細(xì)胞表位重組蛋白,為后續(xù)粉塵螨過敏患者提供特異性免疫治療奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;皖南醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 哮喘 粉塵螨 特異性免疫治療 T細(xì)胞表位
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81270091,30872367) 安徽省自然科學(xué)基金(070413088)
【分類號】：R392
【正文快照】： 近幾十年來全球過敏性疾病患病率急劇上升,80%的患者對塵螨過敏,其影響面覆蓋全人類[1]。塵螨是人類室內(nèi)最主要的過敏原來源,能夠引起過敏性哮喘、過敏性鼻炎、皮炎等疾病[2,3]。塵螨品種眾多,而粉塵螨1類變應(yīng)原(Der f1)被認(rèn)為是最主要的變應(yīng)原之一[4]。人類的研究表明,變應(yīng)原

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1 蔡黎,項(xiàng)t

本文編號：441759