釉成熟蛋白多肽多克隆抗體的制備和應(yīng)用
本文關(guān)鍵詞:釉成熟蛋白多肽多克隆抗體的制備和應(yīng)用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的制備兔抗鼠釉成熟蛋白(amelotin)的多克隆抗體并進(jìn)行鑒定和應(yīng)用。方法對amelotin的蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析,選取一段氨基酸序列合成多肽并與鑰孔戚血藍(lán)素(KLH)偶聯(lián)免疫新西蘭大白兔,制備多肽抗體,ELISA檢測抗體效價(jià),Western blot法分析抗體特異性。免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察amelotin在小鼠下頜組織的表達(dá)情況。結(jié)果制備的兔抗amelotin抗體效價(jià)為1∶1 000 000,特異性高。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示amelotin在3、7 d小鼠的磨牙釉質(zhì)全層有強(qiáng)表達(dá),并且在7 d小鼠下頜下腺的導(dǎo)管上皮細(xì)胞質(zhì)中也有表達(dá)。結(jié)論成功制備了效價(jià)高、特異性好的兔抗amelotin抗體。
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學(xué)院口腔學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 釉成熟蛋白 多肽抗體 成釉細(xì)胞
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81441107) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2012HQ036) 山東省教育廳(J12LL51)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 釉成熟蛋白(amelotin)是一種在人的成釉細(xì)胞特異性表達(dá)的蛋白,在小鼠、豬、大鼠等物種中高度保守,相對分子質(zhì)量(Mr)21 000~38 000[1-3]。小鼠amelotin全長c DNA序列為1022 bp,編碼213個(gè)氨基酸,富含亮氨酸、脯氨酸、蘇氨酸殘基,與人的amelotin高度同源[4-6]。Amelotin家族成員
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本文編號(hào):439329
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