釉成熟蛋白多肽多克隆抗體的制備和應用
本文關鍵詞:釉成熟蛋白多肽多克隆抗體的制備和應用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的制備兔抗鼠釉成熟蛋白(amelotin)的多克隆抗體并進行鑒定和應用。方法對amelotin的蛋白質(zhì)序列進行分析,選取一段氨基酸序列合成多肽并與鑰孔戚血藍素(KLH)偶聯(lián)免疫新西蘭大白兔,制備多肽抗體,ELISA檢測抗體效價,Western blot法分析抗體特異性。免疫組織化學技術觀察amelotin在小鼠下頜組織的表達情況。結果制備的兔抗amelotin抗體效價為1∶1 000 000,特異性高。免疫組織化學染色結果顯示amelotin在3、7 d小鼠的磨牙釉質(zhì)全層有強表達,并且在7 d小鼠下頜下腺的導管上皮細胞質(zhì)中也有表達。結論成功制備了效價高、特異性好的兔抗amelotin抗體。
【作者單位】: 濰坊醫(yī)學院口腔學院口腔醫(yī)學研究所;
【關鍵詞】: 釉成熟蛋白 多肽抗體 成釉細胞
【基金】:國家自然科學基金(81441107) 山東省自然科學基金(ZR2012HQ036) 山東省教育廳(J12LL51)
【分類號】:R392
【正文快照】: 釉成熟蛋白(amelotin)是一種在人的成釉細胞特異性表達的蛋白,在小鼠、豬、大鼠等物種中高度保守,相對分子質(zhì)量(Mr)21 000~38 000[1-3]。小鼠amelotin全長c DNA序列為1022 bp,編碼213個氨基酸,富含亮氨酸、脯氨酸、蘇氨酸殘基,與人的amelotin高度同源[4-6]。Amelotin家族成員
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