本研究將微生物學、免疫學、分子生物學和生物材料學等多學科有機結合起來，運用基因重組技術構建了可示蹤的防齲基因疫苗；對可生物降解材料作為防齲基因疫苗釋放系統(tǒng)進行了研究；并對防齲基因疫苗在體內外的表達以及不同方式免疫的BALB／C小鼠的特異性抗體進行了檢測。通過GFP的指示作用及免疫組化方法，對防齲基因疫苗在體內外的表達進行初步的示蹤研究，為防齲基因疫苗的臨床應用奠定基礎。本研究共包括四個部分。 第一，本研究構建了以綠熒光蛋白基因作為報告基因的可示蹤的防齲基因疫苗。利用PCR方法，擴增變異鏈球菌(Streptococci mutans，S．mutans)MT8148菌株表面蛋白抗原PAC氨基端的基因片段pac-A(1.3Kb)。PCR產物與真核表達質粒pEGFP-C1雙酶切，并回收相應DNA片段后，采用DNA連接試劑盒進行連接重組，轉化。轉化子中的重組質粒經雙酶切鑒定，獲得了4.7Kb與1.3Kb兩個片段；重組質粒中插入基因的序列測定表明，該插入序列與pac全基因的314-1630bp的核酸序列完全相同，插入基因的兩側分別與Kpn Ⅰ和Apa Ⅰ酶切位點的序列一致，插入基因的上游有...

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 可示蹤的防齲基因疫苗的構建
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
    附圖
第二部分 重組質粒在體外哺乳動物細胞中的表達
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
    附圖
第三部分 防齲基因疫苗DNA／PELA微球的制備、性質及其體外轉染的研究
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
    附圖
第四部分 防齲基因疫苗及其PELA微球免疫BALB／c小鼠的實驗研究
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
    附圖
主要參考文獻
文獻綜述 基因轉移中非病毒運載體系統(tǒng)的研究進展
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3998625