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三維神經(jīng)干細(xì)胞分化模型在神經(jīng)藥物檢測(cè)中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2017-06-08 00:18

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【摘要】:將神經(jīng)干細(xì)胞接種在透明質(zhì)酸支架進(jìn)行三維(3D)培養(yǎng),使用傳統(tǒng)平面(2D)培養(yǎng)做對(duì)比,經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行1,7,14 d誘導(dǎo)分化。采用細(xì)胞免疫組織化學(xué)和Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞特異性標(biāo)記物巢蛋白(nestin)、神經(jīng)元微管蛋白(tubulin)及膠質(zhì)細(xì)胞膠原纖維酸性蛋白(glial fi brillary acidic protein,GFAP)在蛋白水平和m RNA水平上的變化;CCK-8和活細(xì)胞染色技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞的增殖能力及神經(jīng)細(xì)胞膜損傷修復(fù)效果。結(jié)果顯示,神經(jīng)干細(xì)胞在3D和2D培養(yǎng)條件下經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)14 d后,tubulin表達(dá)量明顯增加,而GFAP表達(dá)量降低,3D效果更加明顯。CCK-8和活細(xì)胞染色結(jié)果顯示,干細(xì)胞在3D培養(yǎng)條件下較2D培養(yǎng)條件下其分化和分化后的神經(jīng)細(xì)胞膜損傷修復(fù)效果顯著。三維培養(yǎng)模型能夠?qū)ι窠?jīng)細(xì)胞分化后的藥物損傷模型起到更好的保護(hù)作用。因此認(rèn)為,3D透明質(zhì)酸 神經(jīng)細(xì)胞分化模型是更適合于構(gòu)建體外神經(jīng)藥物篩選及安全性檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)模型。
【作者單位】: 天津衛(wèi)凱生物工程有限公司;天津中醫(yī)藥大學(xué)天津市現(xiàn)代中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;英國(guó)牛津大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程研究所;
【關(guān)鍵詞】神經(jīng)干細(xì)胞分化 D培養(yǎng) 透明質(zhì)酸 體外藥物檢測(cè)模型 膜損傷修復(fù)
【基金】:國(guó)家科技部國(guó)際合作項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2011DFA31960)資助的課題~~
【分類(lèi)號(hào)】:R329
【正文快照】: 3英國(guó)牛津大學(xué),生物醫(yī)學(xué)工程研究所,牛津OX13PJ)目前普遍使用的神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法多為單層貼壁培養(yǎng)(2D)以及3D無(wú)支架神經(jīng)球培養(yǎng)。單層貼壁培養(yǎng)以1952年Dulbecco開(kāi)展的單層傳代培養(yǎng)為代表[1],標(biāo)志著進(jìn)入了細(xì)胞體外研究時(shí)代。此種方法優(yōu)點(diǎn)包括操作簡(jiǎn)單、環(huán)境可控性強(qiáng)、樣品特

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 葉青;何為民;康劍書(shū);;透明質(zhì)酸酶對(duì)眼眶成纖維細(xì)胞增殖及分泌透明質(zhì)酸的影響[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

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3 張曉琦,,陳穎怡;高效液相色譜法測(cè)定銀杏葉提取物中槲皮素的含量[J];色譜;1994年04期

4 刁波;唐瑛;李德忠;鄧惠玲;文曄;王曉昆;;刺五加多糖對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元氧化應(yīng)激損傷及細(xì)胞凋亡相關(guān)基因-2家族的影響[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2008年11期

5 巴曉紅;劉英;;銀杏葉提取物及銀杏總內(nèi)酯對(duì)帕金森病大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用[J];中國(guó)臨床康復(fù);2006年11期

6 關(guān)水;葛丹;陸瑞欣;劉天慶;馬學(xué)虎;崔占峰;;神經(jīng)干細(xì)胞體外三維培養(yǎng)模型的構(gòu)建[J];中國(guó)科技論文在線;2011年03期

7 陳旭春;程穎;楊蕾;李弘;劉永鋒;;三維及二維培養(yǎng)大鼠胰腺導(dǎo)管來(lái)源干細(xì)胞的體外對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2012年07期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 上官小東,王黨社;AlCl_3-分光光度法測(cè)定銀杏黃酮的含量[J];寶雞文理學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2004年04期

3 賈延R

本文編號(hào):430801


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