本文關(guān)鍵詞：抗CD20單鏈抗體融合顯性抗原肽的原核表達(dá)和其抑瘤活性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:人工設(shè)計(jì)并表達(dá)美羅華(C2B8)單鏈可變區(qū)抗體與李斯特菌溶細(xì)胞素O(Listeriolysin O,LLO)顯性抗原表位構(gòu)成的重組融合蛋白(Sc Fv-p LLO),初步分析其抗淋巴瘤細(xì)胞活性。方法:查詢數(shù)據(jù)庫(kù)獲得美羅華(C2B8)單抗VH和VL基因序列,構(gòu)建抗CD20單鏈抗體(Sc Fv)基因序列,選取LLO的2個(gè)CD4+T細(xì)胞表位,構(gòu)建單鏈抗體融合抗原表位的重組蛋白基因序列,克隆至原核表達(dá)載體,經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)純化,流式細(xì)胞術(shù)和免疫共沉淀分析其與淋巴瘤細(xì)胞結(jié)合能力,細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)測(cè)定其對(duì)淋巴瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,凋亡實(shí)驗(yàn)分析其誘導(dǎo)淋巴瘤細(xì)胞凋亡的能力,淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)分析其免疫原性。結(jié)果:成功誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白Sc Fv-p LLO。Sc Fv-p LLO可不同程度地靶向結(jié)合不同淋巴瘤細(xì)胞系,并明顯抑制Raji細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)其凋亡。Sc Fv-p LLO可刺激免疫小鼠脾細(xì)胞增殖。結(jié)論:重組蛋白Sc Fv-p LLO保留了Sc Fv的功能,可靶向結(jié)合和抑制CD20陽(yáng)性淋巴瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),同時(shí)可激活機(jī)體免疫應(yīng)答,為進(jìn)一步研究其模擬瘤細(xì)胞表面抗原和作為瘤細(xì)胞疫苗佐劑的功能奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院病理學(xué)系和細(xì)胞資源中心;
【關(guān)鍵詞】： CD 單鏈抗體 B細(xì)胞淋巴瘤 抗原表位 李斯特菌溶細(xì)胞素O
【基金】：國(guó)家科技部科技基礎(chǔ)基金資助項(xiàng)目(NSTI-CR14)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： 目前腫瘤靶向治療在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐方面均取得顯著發(fā)展,其中單克隆抗體逐漸成為腫瘤靶向治療的主力軍。B細(xì)胞淋巴瘤是一種血液系統(tǒng)疾病,采用傳統(tǒng)治療手段臨床療效較差。隨著對(duì)CD20分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的認(rèn)識(shí),抗CD20單克隆抗體的設(shè)計(jì)開發(fā)在B細(xì)胞淋巴瘤的臨床治療中取得重要進(jìn)展。

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本文編號(hào)：421443