本文關鍵詞：嗜肺軍團菌巨噬細胞感染增強蛋白的表達和純化及其在血清學診斷中的應用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的表達和純化出嗜肺軍團菌巨噬細胞感染增強(MIP)蛋白,研究其在軍團菌肺炎血清學診斷中應用價值。方法將已構建成功的重組質粒pET-mip轉化E.coli BL21感受態(tài)細胞,誘導MIP蛋白表達,運用SDS-PAGE分析和親和層析法純化。用DRG軍團菌IgG/IgM/IgA的ELISA檢測試劑盒篩出40份陽性血清和30份陰性血清,用純化的MIP蛋白建立間接ELISA,同時與RD的ELISA IgG、IgM、IgA試劑盒分別檢測已篩選血清中的IgG、IgM、IgA抗體,然后對這兩種方法進行比較,通過敏感性、特異性以及不同檢測結果的一致性,來評價該方法的應用價值。結果誘導相對分子質量(Mr)大約40 000的MIP融合蛋白在E.coli BL21中表達并純化。純化蛋白建立的間接ELISA分別檢測篩選血清中IgG、IgM、IgA抗體與國外ELISA試劑盒(RD)進行比較,IgG抗體的靈敏度88.5%,特異度95.5%,一致性Kappa值0.846(P0.05),ROC曲線下面積0.927。IgM抗體的靈敏度89.3%,特異度97.6%,一致性Kappa值0.88(P0.05),ROC曲線下面積0.947。IgA抗體的靈敏度90%,特異度95.2%,一致性Kappa值0.856(P0.05),ROC曲線下面積0.931。結論成功誘導了嗜肺軍團菌MIP蛋白穩(wěn)定表達并純化,運用MIP作為包被抗原的軍團菌肺炎的血清學診斷方法具有較高的診斷價值。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病原生物學與免疫學系;生育力保持省部級共建教育部重點實驗室;
【關鍵詞】： 嗜肺軍團菌 巨噬細胞感染增強蛋白 蛋白表達 血清學診斷
【基金】：國家自然科學基金(30860264) 寧夏自然科學基金(NZ0992)
【分類號】：R446.1
【正文快照】： 軍團病是一種急性呼吸道傳染病,主要通過氣溶膠傳播,該病缺乏典型的癥狀和體征,治療延遲或治療方法不當病死率較高。因此特異、敏感、快速的檢測方法對該病的防治非常重要。軍團病確診的“金標準”仍是培養(yǎng)出致病菌,但陽性率低,很難滿足臨床的需求[1]。PCR技術有較高的敏感性

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