PSGL-1交聯(lián)對αLβ2整合素介導的白細胞粘附的作用和機制初步研究
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【摘要】:炎癥是一種十分常見且重要的病理過程,它是具有血管系統(tǒng)的活體組織對致炎因子發(fā)生的防御性的反應,炎癥反應失調會給機體帶來很多負面影響。炎癥過程中,白細胞要從血液中被募集到炎癥部位發(fā)揮生物學效應。這個過程受到表達于白細胞和血管內皮細胞表面的各種粘附分子的調控。白細胞的滾動過程(即起始粘附)是由選擇素和它的配體相互作用介導的,這種相互作用產(chǎn)生的信號可以協(xié)同趨化因子信號調控整合素的活化,活化的整合素與配體相互作用,能夠使白細胞在血管內皮上的滾動速度變慢并粘附到血管內皮上,最終跨越血管內皮和胞外基質到達炎癥部位。 PSGL-1作為選擇素的重要配體,組成性表達于多種白細胞表面。本實驗中,,我們通過靜止粘附實驗發(fā)現(xiàn)PSGL-1交聯(lián)引起Jurkat細胞在Fibrinogen上的粘附,并且通過流式和免疫熒光實驗證明了PSGL-1交聯(lián)能夠誘導Jurkat細胞表面αLβ2整合素發(fā)生簇集。通過細胞膜成分的分離以及特異性破壞脂筏的藥物MβCD處理細胞進一步研究發(fā)現(xiàn),PSGL-1交聯(lián)引起Jurkat細胞粘附這一生理事件,依賴于脂筏結構的完整性及Syk激酶的活性。本研究結果為進一步探討白細胞起始粘附向穩(wěn)定粘附轉變奠定了一定的基礎。
【關鍵詞】:白細胞粘附 αLβ2整合素 脂筏 Syk激酶
【學位授予單位】:東北師范大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R363
【目錄】:
- 摘要4-5
- Abstract5-6
- 目錄6-8
- 引言8-21
- 一、 白細胞的粘附和遷移9-11
- (一) 白細胞的粘附9-10
- (二) 白細胞的遷移10-11
- 二、 選擇素概述11-12
- (一) 選擇素的種類及結構11-12
- (二) 選擇素的配體12
- 三、 PSGL-1 概述12-14
- (一) PSGL-1 的結構12-13
- (二) PSGL-1 介導的信號途徑13-14
- 四、 整合素概述14-16
- (一) 整合素的種類及結構14-15
- (二) 整合素的配體與活化15-16
- (三) 白細胞中表達的整合素及β2 整合素的作用16
- 五、 脂筏概述16-18
- (一) 脂筏的結構16-17
- (二) 脂筏與細胞信號轉導17-18
- 六、 Syk 概述18-20
- (一) Syk 的結構18-19
- (二) Syk 的活化19-20
- (三) Syk 的功能20
- 七、 本論文的研究意義20-21
- 材料與方法21-26
- 一、 實驗材料21-23
- (一) 細胞21
- (二) 抗體21
- (三) 試劑21
- (四) 主要溶液21-22
- (五) 主要儀器設備22-23
- 二、 實驗方法23-26
- (一) 細胞的培養(yǎng)基凍存23
- (二) 中性粒細胞的提取23
- (三) Jurkat 細胞的靜止粘附實驗23
- (四) 免疫熒光及流式細胞儀分析23-24
- (五) 細胞亞組分的分離提取24
- (六) 蛋白質電泳及免疫印跡24-26
- 結果與分析26-31
- 一、 PSGL-1 交聯(lián)介導了 LFA-1 依賴的 Jurkat 細胞在 Fibrinogen 上的粘附過程26-27
- 二、 PSGL-1 交聯(lián)引起了細胞表面αLβ2 整合素的簇集27-28
- 三、 Syk 參與了αLβ2 整合素依賴的 Jurkat 的粘附且依賴脂筏結構的完整性28-29
- 四、 Syk 激酶影響了 KPL 刺激引起的 Jurkat 細胞表面αLβ2 整合素的簇集29-31
- 討論31-33
- 一、 Syk 參與了 PSGL-1 交聯(lián)引起的αLβ2 介導的 Jurkat 細胞在 Fibrinogen 上的粘附31-32
- 二、 PSGL-1 交聯(lián)引起的 Jurkat 細胞在 Fibrinogen 上的粘附依賴脂筏結構的完整性32-33
- 結論33-34
- 參考文獻34-40
- 致謝40
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本文編號:415463
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