本文關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)全血白細(xì)胞吞噬白念珠菌方法的建立和應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立全血白細(xì)胞吞噬白念珠菌的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)方法。方法繪制白念珠菌生長(zhǎng)曲線后,取生長(zhǎng)對(duì)數(shù)中期的白念珠菌,以活體細(xì)胞示蹤熒光探針二乙酰羧基熒光黃琥珀酰亞胺酯(CFDA-SE)標(biāo)記,與以PC5標(biāo)記的CD45單克隆抗體預(yù)標(biāo)記的全血白細(xì)胞,在37℃分別反應(yīng)10、30、60min(MOI≈10∶1),以流式細(xì)胞術(shù)觀察CD45陽性細(xì)胞對(duì)白念珠菌的吞噬情況。結(jié)果白念珠菌在液體酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基(YPD)中37℃、50mL/LCO2培養(yǎng),第5~11h為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。10mmol/LCFDA-SE染色30min,可使白念珠菌均勻著色;CD45陽性細(xì)胞和標(biāo)記的白念珠菌作用10、30、60min,CD45陽性細(xì)胞中中性粒細(xì)胞的吞噬率分別為(80.1±6.1)%、(83.8±7.7)%和(92.3±11.2)%;單核細(xì)胞的吞噬率為(11.2±3.6)%、(15.8±4.4)%和(27.7±6.8)%,淋巴細(xì)胞作為無明顯吞噬作用內(nèi)參,其吞噬率為(0.9±0.3)%、(0.8±0.4)%和(5.2±1.6)%。結(jié)論成功建立流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)全血白細(xì)胞吞噬白念珠菌的方法,全血白細(xì)胞與白念珠菌共孵育30min是較為合適的作用時(shí)間。
【作者單位】： 解放軍白求恩國際和平醫(yī)院檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 流式細(xì)胞術(shù) 白念珠菌 吞噬
【基金】：河北省自然科學(xué)基金(C2010001882) 河北省衛(wèi)生廳指導(dǎo)性課題項(xiàng)目(ZD20140031) 白求恩國際和平醫(yī)院計(jì)劃課題(201430)
【分類號(hào)】：R379.4;R392.12
【正文快照】： 白念珠菌(Candida albicans)是一種重要的機(jī)會(huì)致病性病原體,在宿主免疫功能受到損傷或者下降時(shí),可以對(duì)人體發(fā)生侵襲性感染,造成宿主器官的嚴(yán)重?fù)p害甚至威脅生命[1]。近年來,侵襲性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的患病率與致死率不斷攀升[2-4],據(jù)調(diào)查,目前念珠菌血癥占醫(yī)

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  本文關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)全血白細(xì)胞吞噬白念珠菌方法的建立和應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：415388