Axud1(Axin1 up-regulated)基因是近年來在人類結(jié)腸癌細胞中鑒定出的受Wnt信號通路中的軸蛋白AXIN1上調(diào)表達的基因。該基因含有五個外顯子，其編碼產(chǎn)物為分子量63kD的細胞核內(nèi)蛋白，該基因在肺癌、腎癌、肝癌和結(jié)腸癌中的表達較相應(yīng)的正常組織均明顯降低。通過GENK BANK上BLAST的搜索結(jié)果表明，AXUD1與TGF-β誘導(dǎo)的凋亡蛋白2、12(TAIP-2、TAIP-12有較高的同源性，提示axud1可能是一個具有腫瘤抑制功能的基因，并可能在TGF-β誘導(dǎo)的細胞凋亡中起著重要作用。 為了進一步研究AXUD1在人類腫瘤發(fā)生中的作用及axud1基因的表達狀況與TGF-β介導(dǎo)的信號通路的關(guān)系，本實驗研究分為三個部分：(1)axud1基因cDNA全長編碼區(qū)的克隆和HA表位標記的axud1基因表達載體的構(gòu)建；(2)探討肝癌細胞HepG2和肺腺癌SPC-A1細胞中TGF-β1誘導(dǎo)的axud1基因表達的時間、劑量效應(yīng)以及誘導(dǎo)表達的可能機理，并研究AXUD1的過表達對細胞周期和細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響；(3)axud1原核表達載體的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達。 ...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

月IJ舀糖蛋白介導(dǎo)的Wnt信號通路在許多細胞過程，如細胞遷移、形態(tài)發(fā)生及腫瘤的發(fā)生等過程中起著極為重要的類，Wnt作用于細胞表面受體Fri22led，繼而激lled家族蛋白(Dsh)，包括Dvl一1，Dvl一2，和Dvl一3合成酶激酶3p(GSK一3p)的效應(yīng)，從而穩(wěn)定p一cat....

圖2Smad介導(dǎo)的TGF一p信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

第一軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文mad，R一Smad)，包括Smadl、SmadZ、Smad3、SmMad，這一類Smad在特定的TGF一p超家族成員介揮作用，如:BMPZ/4通過Smadl和Smads，TGF一和Smad3;(2)通用Smad(CommonSmad，C一Sm的Medea....

圖1一4A:重組質(zhì)粒pGEM一T/axudl用SP6引物測序結(jié)果

—452bPZsobp一圖1一ZB:重組質(zhì)粒pGEM一T/axudl(S)和pGEM一1’/axudl(AS)的酶切鑒定l矛19.1一ZB:工dentifieationofRestrietionmaPofreeombinantplasmidspGEM一T/axudl(S)andp....

圖2一4;FCM測定HepGZ/peDNA3.1和HepGZ/ha一axudl兩組細胞中DNA

二公……健健健淵淵淵姍姍姍姍姍(B)HepGZ/ha一axudl圖2一4;的含量FCM測定HepGZ/peDNA3.1和HepGZ/ha一axudl兩組細胞中DNAFigZ一4:DNACOfltefltanaylsisforHepGZ/peDNA3.1andHepGZ/ha一ax....

本文編號：3923674