抗輻射菌Deinoeoccus radiodurans(Dr)是一種對(duì)電離輻射，紫外線及其他一些DNA損傷劑具有顯著抗性的微球菌。該菌能在輻照后幾小時(shí)內(nèi)準(zhǔn)確無誤地修復(fù)每條染色體上至少150多個(gè)DNA雙鏈斷裂(DSB)。已有的研究表明該獨(dú)特抗性歸功于其高效精確的DNA損傷修復(fù)能力。然而，對(duì)其修復(fù)路徑及機(jī)制知之甚少。D.radiodurans中是否存在SOS修復(fù)路徑，及在E.coli等菌中廣泛存在的LexA修復(fù)蛋白在D.radiodurans 中的功能特性如何均是未解之迷。本研究利用已克隆構(gòu)建的D.radiodurans lexA基因重組質(zhì)粒pZA172，轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109并在IPTG誘導(dǎo)下獲得了高效表達(dá)，Dr LexA分子量約25.4KDa。實(shí)驗(yàn)表明IPTG濃度為0.1 mM，誘導(dǎo)時(shí)間為24 h時(shí)LexA蛋白表達(dá)效果最佳。大體積培養(yǎng)表達(dá)菌時(shí)，氨芐青霉素濃度為25 μg／ml及IPTG誘導(dǎo)濃度為0.1mM時(shí)，LexA表達(dá)量較高。 我們對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行了純化并進(jìn)一步研究了純化LexA的功能特性。培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)溶菌酶，反復(fù)凍融，超聲等裂解破膜后，再通過高速離心，層析，超濾濃縮等技術(shù)使Le...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言（研究背景）
第一部分 D．radiodurans lexA的表達(dá)及其表達(dá)產(chǎn)物的純化
第二部分 D．radiodurans LexA蛋白DNA結(jié)合位點(diǎn)分析
第三部分 電離輻射對(duì)D．radiodurans LexA蛋白表達(dá)水平的影響
第四部分 RecA激活的D．radiodurans LexA蛋白降解及其自動(dòng)降解
第五部分 D．radiodurans pprA,orf144c,lexA基因突變株的構(gòu)建
第六部分 D．radiodurans LexA基因突變體的性質(zhì)
結(jié)論
圖表
參考文獻(xiàn)
附錄1 致謝
附錄2 博士期間發(fā)表論文目錄



本文編號(hào)：3884232