艾滋病在全球的快速傳播嚴(yán)重威脅著人們的生命與健康。研制出一種能有效預(yù)防HIV感染和控制HIV病毒復(fù)制的HIV疫苗成為當(dāng)前科學(xué)界的首要任務(wù)。痘苗病毒載體是目前倍受關(guān)注的新型艾滋病疫苗載體,它能激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng),而CD4⁺T細(xì)胞和CD8⁺T細(xì)胞在控制HIV復(fù)制方面起著重要作用。 本實(shí)驗(yàn)中所研究的ADMVA疫苗是以痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia Ankara,MVA)為載體,插入了人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亞型的五個基因,分別是env、gag、pol、nef、tat。 本實(shí)驗(yàn)主要研究該疫苗的免疫原性,實(shí)驗(yàn)中設(shè)立10⁵pfu/mL、10⁶pfu/mL、10⁷pfu/mL ADMVA三個劑量組,用ELISPOT方法檢測細(xì)胞免疫反應(yīng)。同時,以Gag蛋白作為包被抗原,使用間接ELISA的方法檢測體液免疫反應(yīng)。結(jié)果顯示免疫后的小鼠對插入基因env、gag、pol和nef所表達(dá)蛋白均產(chǎn)生了特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答,且免疫效果與免疫劑量呈正相關(guān)。ELI...

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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引言
一、實(shí)驗(yàn)材料及方法
    (一)、實(shí)驗(yàn)材料
    (二)、實(shí)驗(yàn)方法
二、結(jié)果與分析
    (一) 重組ADMVA病毒疫苗鑒定
    (二) 重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-gag的鑒定
    (三) 重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-gag的誘導(dǎo)表達(dá)
    (四) 融合蛋白GST-Gag的純化
    (五) Western Blot分析鑒定表達(dá)產(chǎn)物
    (六) 純化蛋白的濃度測定
    (七) ELISPOT檢測ADMVA疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)
    (八) 體液免疫反應(yīng)的檢測
三、討論
    3.1 艾滋病疫苗的研究策略
    3.2 HIV毒株選擇
    3.3 構(gòu)建重組疫苗的目的基因的選取
    3.4 GST融合蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
    3.5 動物實(shí)驗(yàn)
    3.6 問題和展望
四、小結(jié)
參考文獻(xiàn)
論文綜述
附錄
致謝
研究生簡歷



本文編號：3879675