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卡介苗培養(yǎng)濾出液中O-甘露糖基化蛋白的確定和解析

發(fā)布時(shí)間:2023-12-12 19:16
  卡介苗作為預(yù)防結(jié)核病的唯一疫苗,不能提供全面的保護(hù)力,因此全面認(rèn)識(shí)卡介苗的抗原非常關(guān)鍵。甘露糖復(fù)合物抗原是存在于分枝桿菌細(xì)胞壁上的一大類重要抗原,在細(xì)菌毒力以及宿主細(xì)胞相互作用等方面發(fā)揮作用,其中O-甘露糖基化蛋白在結(jié)核分枝桿菌和恥垢分枝桿菌中陸續(xù)有報(bào)道,但在卡介苗中研究很少。利用Con-A親和層析技術(shù)提純了卡介苗培養(yǎng)濾出液中的O-甘露糖基化蛋白,并經(jīng)過Con A-免疫印跡再次確證,最后利用質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行了解析,共確定出7個(gè)O-甘露糖基化蛋白,并對(duì)功能和糖基化位點(diǎn)進(jìn)行了初步預(yù)測(cè)。O-甘露糖基化蛋白的確定和解析將有助于對(duì)卡介苗免疫機(jī)制的認(rèn)識(shí)。

【文章頁數(shù)】:3 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細(xì)菌和培養(yǎng)條件
    1.2 培養(yǎng)濾出液 (Culture filter, CF) 中蛋白的提取
    1.3 ConA瓊脂糖親和層析獲得O-甘露糖基化蛋白
    1.4 O-甘露糖蛋白的確證和解析
    1.5 O-甘露糖蛋白的解析
2 結(jié)果與分析
    2.1 Con A瓊脂糖親和層析洗脫液SDS-PAGE的銀染結(jié)果
    2.2 Con A瓊脂糖親和層析洗脫液印記確證結(jié)果
    2.3 O-甘露糖基化蛋白質(zhì)譜解析和糖基化位點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果
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