目的探討顆粒蛋白前體(PGRN)對去卵巢小鼠骨質(zhì)疏松的影響。方法建立野生型和PGRN敲除(PGRN^-/-)小鼠卵巢切除骨質(zhì)疏松模型,采用微型計算機斷層掃描(Micro-CT)和三維重建獲得小鼠骨組織微觀結(jié)構(gòu)并進行骨小梁數(shù)據(jù)分析, HE染色觀察骨組織形態(tài),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色觀察骨組織中破骨細胞數(shù)量,免疫組織化學(xué)染色法檢測骨組織核因子κB受體激活蛋白配體(RANKL)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、 P65表達,熒光定量PCR檢測骨組織TRAP mRNA水平, Western blot法檢測骨組織基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)、 MMP14、 P65蛋白水平。結(jié)果與野生型小鼠相比, PGRN^-/-組小鼠骨密度(BMD)、骨體積分數(shù)(BV/TV)、骨小梁數(shù)目(Tb.N)及骨小梁厚度(Tb.Th)均顯著增加,骨小梁空間距(Tb.S)顯著降低;在PGRN^-/-小鼠中觀察到骨質(zhì)疏松程度更輕,破骨細胞數(shù)量更少,骨組織RANKL、 TNF-α、 P65蛋白, TRAP mRNA, MMP9、 MMP14表達均低于野生型小鼠...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠卵巢切除骨質(zhì)疏松模型的建立
        1.2.2 微型計算機斷層掃描(Micro-CT)檢查小鼠腰椎骨質(zhì)疏松情況
        1.2.3 HE染色檢測小鼠腰椎骨組織形態(tài)
        1.2.4 TRAP染色檢測小鼠股骨組織破骨細胞數(shù)量
        1.2.5 免疫組織化學(xué)染色法檢測小鼠股骨組織RANKL、 TNF-α、 P65的表達
        1.2.6 反轉(zhuǎn)錄PCR檢測股骨組織TRAP mRNA水平
        1.2.7 Western blot法檢測MMP9、 MMP14、 P65蛋白水平
        1.2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 PGRN-/-小鼠腰椎BMD、 BV/TV、 Tb.N、 Tb.Th顯著增高, Tb.S顯著降低
    2.2 PGRN-/-小鼠腰椎組織骨小梁結(jié)構(gòu)較好
    2.3 PGRN-/-組小鼠骨組織破骨細胞數(shù)量減少
    2.4 PGRN-/-組小鼠股骨組織RANKL、 TNF-α、 P65表達減少
    2.5 PGRN-/-組小鼠股骨組織TRAP mRNA、 MMP9、 MMP14、 P65蛋白水平降低



本文編號：3839236