發(fā)布時間：2023-06-03 06:36

　　目的： 在制備抗Na+/Ca2+交換體α-2(840-877)單克隆抗體的基礎(chǔ)上,觀察其對大鼠心室肌細(xì)胞Na+/Ca2+交換電流以及L-型鈣通道、鈉通道、內(nèi)向整流鉀通道和瞬時外向鉀通道電流的影響。 方法： 1.單克隆抗體的制備和純化：用化學(xué)合成的Na+/Ca2+交換體α-2重復(fù)序列肽段(第840-877位氨基酸殘基,其序列為algtsvpdtfaskvaatqdqyadasignvtgsnavnvf,簡稱α-2(840-877))主動免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)融合,經(jīng)陽性克隆篩選、亞克隆及腹水誘生等步驟制備抗Na+/Ca2+交換體α-2(840-877)單克隆抗體；利用抗原親和純化柱對抗體進(jìn)行純化,并對純化后的抗體進(jìn)行ELISA檢測,確定抗體效價。 2.大鼠心室肌細(xì)胞的分離：采用膠原酶法急性分離大鼠心室肌細(xì)胞。選用健康成年SD大鼠(體重250-300g),擊昏放血,迅速開胸取出心臟,修剪后懸掛在Langendorff灌流裝置上行主動脈逆行灌流,先用無鈣臺式液灌流8-10分鐘,再用膠原酶液(膠原酶P)循環(huán)灌流15-20分鐘,待心室變大、變軟后剪下心室...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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摘要
Abstract
縮略詞表
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個人簡介
致謝



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