幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，簡稱Hp）是定植于人胃部的一種革蘭氏陰性菌，它與慢性胃炎、消化性潰瘍、粘膜相關(guān)淋巴樣組織性淋巴瘤、胃癌等疾病的發(fā)生密切相關(guān)，它的感染率高，并且因為人免疫系統(tǒng)無法根除而長期生存于人的胃部。空泡毒素基因的表達產(chǎn)物—VacA（vacuolating cytotoxin A）是Hp所特有的分泌性毒素，是Hp的重要毒力因子，在體外，它能使哺乳動物上皮細胞發(fā)生空泡樣變化，最終導致細胞死亡，它與Hp感染者的發(fā)病與否相關(guān)。 在本研究工作中，我們首先對vacA基因進行分段克隆、表達。根據(jù)菌種CCUG 17874的VacA基因序列設(shè)計六對引物，以Hp菌株NCTC11638的總DNA為模板，擴增出vacA基因A、B、C、D、E和F六個片段，測序證實與文獻報道的完全一致，將它們分別克隆入融合表達載體pRSETA，構(gòu)建重組融合表達載體pRSET-vacA，轉(zhuǎn)化大腸桿菌 第四軍醫(yī)大學博士學位論文 SL刀＊臼O…a，經(jīng)IP＊G誘導，表達了五個氨基端融合... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省211工程院校

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分： 文獻回顧幽門螺桿菌空泡毒素基因分子生物學研究進展
    一、 Hp研究簡介
    二、 VacA的生物學特點
    三、 vacA基因的結(jié)構(gòu)
    四、 vacA基因的分型
    五、 空泡毒素的形成
    六、 VacA分子的空間結(jié)構(gòu)
    七、 VacA的生物學功能
    八、 VacA在Hp致病中的作用
    九、 VacA在Hp疫苗中的作用
第二部分： HpvacA基因的分段克隆、表達、純化
    研究內(nèi)容
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討 論
第三部分： 重組VacA片段空泡毒素活性和免疫學活性研究
    研究內(nèi)容
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討 論
參考文獻
小結(jié)
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]含PRPL啟動子的原核高效表達載體的組建及其應(yīng)用[J]. 張智清,姚立紅,侯云德.  病毒學報. 1990(02)



本文編號：3617604