幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，簡稱Hp）是定植于人胃部的一種革蘭氏陰性菌，它與慢性胃炎、消化性潰瘍、粘膜相關(guān)淋巴樣組織性淋巴瘤、胃癌等疾病的發(fā)生密切相關(guān)，它的感染率高，并且因?yàn)槿嗣庖呦到y(tǒng)無法根除而長期生存于人的胃部。空泡毒素基因的表達(dá)產(chǎn)物—VacA（vacuolating cytotoxin A）是Hp所特有的分泌性毒素，是Hp的重要毒力因子，在體外，它能使哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞發(fā)生空泡樣變化，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡，它與Hp感染者的發(fā)病與否相關(guān)。 在本研究工作中，我們首先對vacA基因進(jìn)行分段克隆、表達(dá)。根據(jù)菌種CCUG 17874的VacA基因序列設(shè)計(jì)六對引物，以Hp菌株NCTC11638的總DNA為模板，擴(kuò)增出vacA基因A、B、C、D、E和F六個(gè)片段，測序證實(shí)與文獻(xiàn)報(bào)道的完全一致，將它們分別克隆入融合表達(dá)載體pRSETA，構(gòu)建重組融合表達(dá)載體pRSET-vacA，轉(zhuǎn)化大腸桿菌 第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文 SL刀＊臼O…a，經(jīng)IP＊G誘導(dǎo)，表達(dá)了五個(gè)氨基端融合... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省211工程院校

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分： 文獻(xiàn)回顧幽門螺桿菌空泡毒素基因分子生物學(xué)研究進(jìn)展
    一、 Hp研究簡介
    二、 VacA的生物學(xué)特點(diǎn)
    三、 vacA基因的結(jié)構(gòu)
    四、 vacA基因的分型
    五、 空泡毒素的形成
    六、 VacA分子的空間結(jié)構(gòu)
    七、 VacA的生物學(xué)功能
    八、 VacA在Hp致病中的作用
    九、 VacA在Hp疫苗中的作用
第二部分： HpvacA基因的分段克隆、表達(dá)、純化
    研究內(nèi)容
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討 論
第三部分： 重組VacA片段空泡毒素活性和免疫學(xué)活性研究
    研究內(nèi)容
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討 論
參考文獻(xiàn)
小結(jié)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]含PRPL啟動(dòng)子的原核高效表達(dá)載體的組建及其應(yīng)用[J]. 張智清,姚立紅,侯云德.  病毒學(xué)報(bào). 1990(02)



本文編號：3617604