結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis, Mtb）感染導(dǎo)致的一種嚴(yán)重危害人類及動物健康的重大傳染病,給人類公共衛(wèi)生安全造成嚴(yán)重威脅。肺泡巨噬細(xì)胞作為結(jié)核分枝桿菌感染的靶細(xì)胞在抗結(jié)核感染過程中具有重要作用。宿主-病原相互作用所致的炎性反應(yīng)、巨噬細(xì)胞凋亡與壞死對結(jié)核病的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)歸具有決定性作用。但該過程十分復(fù)雜,并受到多種信號調(diào)控。最新研究表明,Wnt/β-catenin信號對多種感染性疾病的發(fā)生發(fā)展具有重要的調(diào)控作用,但其對結(jié)核分枝桿菌與巨噬細(xì)胞相互作用過程中導(dǎo)致的巨噬細(xì)胞炎性反應(yīng)、凋亡與壞死的調(diào)控機制尚未完全闡明。因此,探討Wnt/β-catenin信號對肺泡巨噬細(xì)胞抗結(jié)核分枝桿菌的免疫調(diào)節(jié)作用具有重要的科學(xué)理論意義。本研究以小鼠肺泡巨噬細(xì)胞系RAW264.7為靶細(xì)胞,用結(jié)核分枝桿菌疫苗株BCG感染并用Wnt3a條件培養(yǎng)基和DKKl分別激活和阻斷RAW264.7細(xì)胞的Wnt/β-catenin信號,并用雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢驗WWnt/β-catenin信號通路的激活與阻斷效果,同時通過流式細(xì)胞術(shù)、激光共聚焦技術(shù)、電鏡、ELISA、實時熒光定量P... 

【文章來源】：寧夏大學(xué)寧夏回族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

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Abstract
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第一章 文獻綜述及目的意義
    1.1 結(jié)核分枝桿菌與巨噬細(xì)胞的相互作用
        1.1.1 結(jié)核分枝桿菌誘發(fā)巨噬細(xì)胞的炎性反應(yīng)
        1.1.2 結(jié)核分枝桿菌與宿主細(xì)胞的凋亡和壞死
    1.2 Wnt/β-catenin信號通路與細(xì)胞程序性死亡
        1.2.1 Wnt/β-catenin信號通路簡介
        1.2.2 Wnt/β-catenin信號通路對炎性反應(yīng)調(diào)控的作用
        1.2.3 Wnt/β-catenin信號通路對細(xì)胞凋亡與壞死的調(diào)控作用
    1.3 研究目的及意義
第二章 Wnt/β-catenin信號對結(jié)核分枝桿菌感染后巨噬細(xì)胞發(fā)生炎性反應(yīng)的調(diào)控作用
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 試驗材料及試劑
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 試驗設(shè)計及技術(shù)路線
        2.2.4 試驗方法
        2.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 Wnt/β-catenin信號通路激活與阻斷效果檢驗
        2.3.2 Wnt/β-catenin信號對BCG感染巨噬細(xì)胞TLR-NFkB信號通路的影響
        2.3.3 Wnt/β-catenin信號對BCG感染后巨噬細(xì)胞炎性因子的調(diào)控
    2.4 小結(jié)
第三章 Wnt/β-catenin信號對結(jié)核分枝桿菌感染后巨噬細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用
    3.1 引言
    3.2 試驗材料與方法
        3.2.1 試驗材料及試劑
        3.2.2 主要儀器
        3.2.3 試驗設(shè)計及技術(shù)路線
        3.2.4 試驗方法
        3.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 Wnt/β-catenin信號提高了BCG感染后巨噬細(xì)胞的凋亡率
        3.3.2 Wnt/β-catenin信號對凋亡相關(guān)蛋白的表達的影響
        3.3.3 Wnt/β-catenin信號對線粒體膜電位的影響
        3.3.4 凋亡細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察
        3.3.5 Hochest和TUNEL染色
        3.3.6 Wnt/β-catenin信號誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡依賴于caspase途徑
        3.3.7 Wnt/β-catenin信號對BCG感染后RAW264.7細(xì)胞周期的調(diào)控機制研究
    3.4 小結(jié)
第四章 Wnt/β-catenin信號對巨噬細(xì)胞抗結(jié)核分枝桿菌感染過程中細(xì)胞壞死的調(diào)控作用
    4.1 引言
    4.2 試驗材料與方法
        4.2.1 試驗材料及試劑
        4.2.2 主要儀器
        4.2.3 試驗設(shè)計及技術(shù)路線
        4.2.4 試驗方法
        4.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 BCG感染可導(dǎo)致巨噬細(xì)胞壞死
        4.3.2 激活Wnt/β-catenin信號通路可減輕BCG感染導(dǎo)致的巨噬細(xì)胞壞死
        4.3.3 正常巨噬細(xì)胞與壞死細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)
        4.3.4 激活Wnt/β-catenin信號通路后抑制BCG感染后巨噬細(xì)胞壞死的機制研究
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論與討論
    5.1
    5.2
    5.3
    5.4
參考文獻
致謝
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【參考文獻】：
期刊論文
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[2]腫瘤壞死因子-α在抗結(jié)核免疫中的作用研究進展[J]. 宋艷華,高孟秋.  中國防癆雜志. 2012(04)
[3]Specific Inhibitory Protein Dkk-1 Blocking Wnt/β-catenin Signaling Pathway Improve Protectives Effect on the Extracellular Matrix[J]. 葉樹楠,王晶,楊述華,許偉華,謝卯,韓奎敬,張波,吳子晏.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2011(05)
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[5]結(jié)核分枝桿菌感染細(xì)胞的信號傳導(dǎo)通路研究進展[J]. 黃曉燕,嚴(yán)杰,李淑萍.  中國人獸共患病學(xué)報. 2006(08)
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