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一種高效促進(jìn)血小板生成的全新型融合蛋白SCF-TPO的分子設(shè)計(jì)及其生物學(xué)活性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-19 21:33
  血小板減少癥不僅是惡性血液。ㄈ绨籽 ⒘馨土黾岸喟l(fā)性骨髓瘤等)誘導(dǎo)緩解、鞏固和加強(qiáng)化療階段的主要并發(fā)癥,也是實(shí)體瘤及其它影響造血細(xì)胞疾病患者放化療過(guò)程常見(jiàn)的嚴(yán)重并發(fā)癥。血小板減少癥的出現(xiàn)不僅增加了患者出血、感染引起的相關(guān)死亡風(fēng)險(xiǎn),也由此限制了使用細(xì)胞毒性化療藥物的最大殺傷劑量。對(duì)肺癌、乳腺癌及卵巢癌等實(shí)體瘤有特效的新化療藥gemcitabine治療過(guò)程中出現(xiàn)的血小板減少癥限制了該藥物的臨床有效應(yīng)用。同時(shí),血小板減少癥也是骨髓增生異常綜合征(MDS)、特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、愛(ài)滋。ˋIDS)及慢性肝病等疾病治療過(guò)程中常見(jiàn)并發(fā)癥,這類疾病出現(xiàn)的慢性血小板減少癥起因?yàn)檠“迳扇毕莼驕p少、免疫或非免疫性血小板破壞增強(qiáng),另外進(jìn)行肝移植、心血管手術(shù)等患者也常伴發(fā)血小板減少癥,最終引起患者死亡率增加。有關(guān)血小板減少癥的治療始終是世界性醫(yī)學(xué)難題。 目前臨床上治療嚴(yán)重血小板減少癥的唯一方法是血小板輸注。盡管輸注血小板可以暫時(shí)緩解化放療所致血小板減少引起的嚴(yán)重出血等并發(fā)癥,但多次反復(fù)輸注血小板增加了疾病傳播機(jī)會(huì)、發(fā)熱、同源免疫反應(yīng)及移植 

【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

一種高效促進(jìn)血小板生成的全新型融合蛋白SCF-TPO的分子設(shè)計(jì)及其生物學(xué)活性研究


PET32a/SCF一TPO表達(dá)產(chǎn)物的SDS一APGE電泳結(jié)果

融合蛋白表達(dá),菌種,最高值,菌株


6表達(dá)條件的優(yōu)化為了提高菌種的表達(dá)量,我們也嘗試了不同大腸桿菌菌株如BL21(DE3)plyss、JM101、JM109作為宿主菌,并對(duì)影響該融合蛋白表達(dá)的幾種因素進(jìn)行了優(yōu)化。發(fā)現(xiàn)各種菌株的表達(dá)量有一定的差異,而BL21(DE3)plyss有較高的表達(dá),如圖1.7所示。同時(shí)我們還對(duì)誘導(dǎo)時(shí)I司對(duì)表達(dá)量的影響進(jìn)行了研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在誘導(dǎo)4一5小時(shí)后表達(dá)量可達(dá)最高值。如圖1.8所示。

免疫印記,細(xì)胞因子,造血生長(zhǎng)因子,融合技術(shù)


AW七stenrblotwithantibodygaainstSCFBW匕stenrblotwithantibodyagainstTPO圖1.9.pET32留SCF一TPo表達(dá)產(chǎn)物的免疫印記結(jié)果Figl.gW匕stenr一blotanalysisoftheProduetsexPressedbyPET32ajSCF一TPOColorMarker:176.5,113.7,80.9,63.8,37.4,26.0,19.6,14.9,8.4l一2:ExPressedProtein3:Negativeeontrol三、討論近十幾年來(lái),隨著對(duì)各種造血生長(zhǎng)因子蛋白基因結(jié)構(gòu)和功能研不斷深入,采用細(xì)胞因子融合技術(shù)構(gòu)建一新型細(xì)胞因子融合蛋白,


本文編號(hào):3090264

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