發(fā)布時(shí)間：2021-03-16 11:30

　　免疫分析是利用抗原與抗體之間的高特異性反應(yīng)實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體、抗原或相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)的分析方法。免疫分析是一種非常重要的生物分析方法,它被廣泛地應(yīng)用于臨床診斷、食品和環(huán)境分析、生物及醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域。目前免疫分析主要以微孔板為實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的異相分析模式。這種方法需要抗體的包埋,緩慢的異相免疫反應(yīng),多次耗時(shí)的沖洗,酶放大反應(yīng)和離線檢測(cè)分析等步驟。因此,這種方法操作繁瑣、分析時(shí)間長(zhǎng)、不能滿足某些快速檢測(cè)和診斷的要求。均相免疫分析不需要分離,能夠直接測(cè)定免疫反應(yīng)混合體系中的待測(cè)物（抗體或者抗原）。這種方法通�？焖�,而且很容易實(shí)現(xiàn)微型化和自動(dòng)化。目前某些檢測(cè)方法如熒光偏振、熒光共振能量轉(zhuǎn)移、生物發(fā)光能量轉(zhuǎn)移被用于均相免疫分析。然而,由于這些檢測(cè)方法的靈敏度較低,不能滿足臨床檢測(cè)的要求。本論文旨在基于單分子和單顆粒技術(shù),發(fā)展高靈敏的均相免疫新方法,用于腫瘤標(biāo)志物的分析。主要研究工作包括如下幾個(gè)方面:1)基于熒光自相關(guān)光譜和互相關(guān)光譜,發(fā)展了均相免疫分析方法。為了克服熒光相關(guān)光譜在研究分子間相互作用時(shí),需要分子量相差4倍的限制,本文構(gòu)思了兩個(gè)策略,即采用熒光交叉相關(guān)光譜系統(tǒng)和減小抗原分子的分子量。首先,我們構(gòu)建... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：146 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

單通道PDMS/蓋玻片雜合型芯片示意圖

nm 的氦-氖激光經(jīng)一雙色鏡(650DRLP，Omega 光焦 (UplanApo，60 × NA1.2，Olympus，Japan) m 的蓋玻片上或注入于制作好的微流控芯片中。針孔后由雪崩式光電二極管(SPCM-AQR14，Perk的信號(hào)由一實(shí)時(shí)數(shù)字收集器(Flex02-12D/C，美 s，時(shí)間間隔為1 ms。視頻由EMCCD拍攝得到，圖為 7.4 × 7.4 μm2。

察物鏡在通道內(nèi)部的聚焦情況。一般實(shí)驗(yàn)前先將微流控芯片固定在熒光相關(guān)光的二維操作平臺(tái)上，初步調(diào)節(jié)物鏡的焦點(diǎn)與通道的位置。然后打開 CCD 視頻統(tǒng)精細(xì)地調(diào)節(jié)焦點(diǎn)在通道中的位置。再向通道中注入待測(cè)溶液，利用熒光相關(guān)統(tǒng)的檢測(cè)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)物鏡高度使物鏡焦點(diǎn)準(zhǔn)確的聚焦在通道內(nèi)部。此時(shí)，一般關(guān)光譜系統(tǒng)的檢測(cè)系統(tǒng)得到 Count Rate 具有最大值。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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