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人胎盤間充質干細胞的分離鑒定及其對臍血造血干/祖細胞體外擴增的支持作用

發(fā)布時間:2021-03-13 14:48
  除造血干細胞外,骨髓中還存在極少量的間充質干細胞(MSC),在體外特定的培養(yǎng)條件下可以大量擴增,并保持其向骨、軟骨、脂肪、腱、肌肉、神經(jīng)及基質細胞等組織的多向分化能力。MSC 的自我更新能力和多向分化能力,使其在臨床上具有巨大的治療潛力。MSC 易于外源基因的轉染和表達,MSC 攜帶的外源基因表達具有組織特異性,可定位于缺陷組織,如對某種基因突變所致遺傳病,可分離自體 MSC,體外進行改造,敲除突變基因,導入正常基因,再回輸體內(nèi)。 此外,MSC 通過分泌可溶性分子如 TGF-β、HGF 及細胞間接觸抑制細胞或有絲分裂原引起的 T 細胞增殖,且這種抑制效果隨著 MSC 參入量的增多而增強。但MSC 并不誘導 T 細胞的凋亡及無能,去除 MSC 后 T 細胞經(jīng)再次刺激還可增殖。 MSC 作為骨髓基質細胞的前體細胞,除可形成骨髓微環(huán)境外,還同基質細胞一樣,表達多種造血相關因子。體外以 MSC 為滋養(yǎng)層短期培養(yǎng)可促進 HSPC 擴增,長期培養(yǎng)可以支持 LTC-IC。體內(nèi) MSC 具有改善骨髓微環(huán)境,促進造血重建的作用,腫瘤患者接受大劑量化療后,進行自體 CD34+細胞聯(lián)合自體 MS... 

【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:105 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

人胎盤間充質干細胞的分離鑒定及其對臍血造血干/祖細胞體外擴增的支持作用


經(jīng)密度梯度離心分離胎盤貼壁細胞形態(tài)特點

胎盤,貼壁細胞,陰性,表面標志


26圖 1-2. 胎盤貼壁細胞組織化學染色。ACP、SB 陰性(A、B),ALP 約 5%弱陽性(C),ANAE 陽性(D),PAS 強陽性(E)。3. 胎盤 MSC 免疫組化染色胎盤 MSC 表達多種粘附分子,E-Cadherin、Desmin、Vimentin、Fibronectin、Laminin 陽性,Smooth Musle Actin 陰性,vWF 陰性。4. 胎盤 MSC 表面標志流式動態(tài)結果流式細胞儀檢測細胞表面標志,動態(tài)觀察第 3、6、9、12、15 代細胞,無明顯改變。不表達造血細胞表面標志即 CD34(HSPC 及內(nèi)皮細胞陽性)、CD45(白細胞陽性),HLA-DR(MHC-II 類分子)持續(xù)陰性,CD29和 CD44(纖維蛋白和透明脂酸鹽的受體,基質細胞表達),CD73(即 SH-3、

流式細胞術,胎盤,貼壁細胞,表型


圖 1-3. 流式細胞術檢測胎盤貼壁細胞表型。CD29、CD44、CD73(SH-3,4)、CD105(SH-2)、CD166、HLA-ABC、UEA-1 陽性,CD35、CD45、HLA-DR 陰性。表 1-1:流式細胞術動態(tài)檢測胎盤 MSC 表面標志(%)CD29 CD34 CD44 CD45 CD73 CD105 CD166 HLA-ABC HLA-DR UEA-1第3代 95.1 1.80 94.7 0.80 98.2 96.6 92.7 95.3 1.10 94.5第6代 96.3 1.25 95.3 1.73 95.2 92.8 93.6 96.9 0.93 97.0第9代 95.7 2.25 94.6 1.44 96.1 93.3 91.8 95.7 1.19 91.8第12代 93.6 0.39 96.8 1.09 95.6 91.2 93.8 97.1 0.67 95.4第15代 92.1 0.49 95.4 1.21 98.0 91.9 95.6 94.3 0.82 98.1


本文編號:3080415

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