電壓依賴性鉀通道（Voltage-dependent potassium channels, KV）廣泛分布于胃腸平滑肌細胞上，對平滑肌運動的調(diào)控起著重要的作用。根據(jù)KV的失活動力學特征可以將胃腸平滑肌上電壓依賴性鉀電流（KVcurrents, IKV）分為快速失活成分（fast inactivation component,IKVfast）和慢速失活成分（slow inactivation component, IKVslow）兩部分。兩種電流具有不同的動力學和藥理學特性。他們在設(shè)定平滑肌靜息膜電位（resting potential, RP）和動作電位（action potential,AP）的塑造等方面發(fā)揮重要作用。因此，當KV通道功能異常時可以導(dǎo)致平滑肌運動異常，但是目前有關(guān)平滑肌細胞KV通道異常與平滑肌動力障礙的研究報道甚少。腸梗阻是外科常見的急腹癥之一，任何原因引起的腸內(nèi)容物通過障礙均可以引起腸梗阻（obstruction）。我們的前期研究表明，在不全性機械性腸梗阻模型中不僅觀察到平滑肌形態(tài)學重建，即平滑肌細胞肥大（hypertrophy）并伴有電生理特性和收縮功能的改變。... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：137 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略語
前言
第一章 小鼠不全性腸梗阻引起的肥大平滑肌細胞電壓依賴性鉀通道的重建
    1.1 引言
    1.2 實驗儀器及材料
        1.2.1 實驗儀器
        1.2.2 主要實驗藥品及試劑
        1.2.3 主要溶液的配制方法
    1.3 實驗方法
        1.3.1 慢性不全性腸梗阻小鼠模型的制備方法
        1.3.2 小腸平滑肌組織的制備
        1.3.3 細胞內(nèi)微電極記錄試驗
        1.3.4 新鮮分離小腸平滑肌細胞制備
        1.3.5 全細胞膜片鉗試驗
        1.3.6 蛋白免疫印跡試驗
        1.3.7 免疫沉淀試驗
        1.3.8 免疫熒光組織化學
        1.3.9 統(tǒng)計學方法
    1.4 實驗結(jié)果
        1.4.1 慢性不全性腸梗阻引起的小腸平滑肌形態(tài)學改變
        1.4.2 梗阻小腸平滑肌慢波和靜息膜電位改變
V電生理學改變">        1.4.3 梗阻小腸平滑肌 K_V電生理學改變
V電流密度的改變">            1.4.3.1 梗阻小腸平滑肌細胞 IK_V電流密度的改變
V通道電壓敏感性的改變">            1.4.3.2 梗阻小腸平滑肌細胞 K_V通道電壓敏感性的改變
V對阻斷劑敏感性的改變">            1.4.3.3 梗阻小腸平滑肌細胞 IK_V對阻斷劑敏感性的改變
V分子生物學特性改變">        1.4.4 梗阻小腸平滑肌細胞 K_V分子生物學特性改變
V表達改變">            1.4.4.1 梗阻小腸平滑肌細胞 K_V表達改變
V通道磷酸化改變">            1.4.4.2 梗阻小腸平滑肌細胞 K_V通道磷酸化改變
    1.5 討論
    1.6 本章小結(jié)
第二章 外源性 H2S 興奮小鼠胃竇平滑肌的離子通道機制研究
    2.1 引言
    2.2 實驗儀器及材料
        2.2.1 實驗儀器
        2.2.2 主要實驗試劑及材料
        2.2.3 主要溶液及配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 胃竇平滑肌收縮實驗
        2.3.2 新鮮分離胃竇平滑肌細胞的制備
        2.3.3 原代培養(yǎng)胃竇平滑肌細胞
        2.3.4 人胚胎腎細胞（H293）細胞培養(yǎng)，凍存和復(fù)蘇
            2.3.4.1 細胞培養(yǎng)
            2.3.4.2 細胞凍存
            2.3.4.3 細胞復(fù)蘇
        2.3.5 轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的制備
        2.3.6 細胞轉(zhuǎn)染
            2.3.6.1 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
            2.3.6.2 siRNA 轉(zhuǎn)染
        2.3.7 細胞膜電位檢測
        2.3.8 蛋白質(zhì) S-sulfhydration 檢測
        2.3.9 免疫印跡實驗
    2.4. 實驗結(jié)果
2S 對小鼠胃竇平滑肌運動的興奮性作用">        2.4.1 4-AP 和 DTT 阻斷 H₂S 對小鼠胃竇平滑肌運動的興奮性作用
2S 對 IK_V的作用">        2.4.2 H₂S 對 IK_V的作用
2S 對 IK_Vfast的抑制作用">        2.4.3 NEM 和 DTT 阻斷 H₂S 對 IK_Vfast的抑制作用
2S 對異源表達的 K_V4 家族各成員電流的影響">        2.4.4 H₂S 對異源表達的 K_V4 家族各成員電流的影響
2S 抑制 K_V4.3 電流作用的影響">        2.4.5 NEM 和 MTSET 對 H₂S 抑制 K_V4.3 電流作用的影響
2S 對培養(yǎng)的小鼠胃竇平滑肌細胞膜電位的影響">        2.4.6 H₂S 對培養(yǎng)的小鼠胃竇平滑肌細胞膜電位的影響
V4.3 對 H₂S 引起的胃竇平滑肌膜電位去極化的影響">        2.4.7 敲減 K_V4.3 對 H₂S 引起的胃竇平滑肌膜電位去極化的影響
2S 對 K_V4.3 通道的硫氫化作用">        2.4.8 H₂S 對 K_V4.3 通道的硫氫化作用
    2.5. 討論
    2.6. 本章小結(jié)
全文小結(jié)
參考文獻
綜述 胃腸平滑肌電壓門控離子通道的研究進展
    參考文獻
致謝
攻讀博士學位期間已發(fā)表或錄用的論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]小鼠不全性腸梗阻對Cajal間質(zhì)細胞表型的影響[J]. 郭新,劉東海,黃旭,陸紅麗,吳貽松,韓燕飛,許文燮.  世界華人消化雜志. 2011(18)



本文編號：3080339