目的：探討異體反應(yīng)性NK細(xì)胞在非清髓骨髓移植中誘導(dǎo)供者特異性耐受的作用機(jī)理。方法：以近交系C57BL／6J（H-2D^b）雌鼠為受鼠，C57BL／6J×BALB／c雜交F1代(H₂D^b/d)雌鼠為供鼠，以氟達(dá)拉濱與環(huán)磷酰胺為移植前的非清髓化療方案，進(jìn)行H-2單倍體骨髓移植。應(yīng)用高強(qiáng)度磁珠分選系統(tǒng)純化供鼠NK細(xì)胞亞群。分選前后NK細(xì)胞的純度用流式細(xì)胞儀檢測(cè)；采用LDH釋放法檢測(cè)磁珠分選后的NK細(xì)胞對(duì)Yac-1淋巴瘤細(xì)胞、自體及異體淋巴細(xì)胞的殺傷。按照對(duì)C57小鼠預(yù)處理?xiàng)l件的不同分為兩組：A組先行化療預(yù)處理，再行骨髓移植；B組行化療預(yù)處理后，輸注供鼠NK細(xì)胞的同時(shí)行骨髓移植。用流式細(xì)胞儀檢測(cè)移植后90天內(nèi)A、B兩組小鼠脾臟和骨髓中H-2D^d細(xì)胞比例，檢測(cè)供體嵌合情況；以F1代小鼠脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞，移植后7天、14天、21天、28天的兩組小鼠及正常C57小鼠的脾細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞行單向混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)；以F1代小鼠脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞，以正常C57小鼠的脾細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，并分別加入移植后23天A組和B組的不... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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Fl供鼠來(lái)源異體反應(yīng)性NK細(xì)胞的流式檢測(cè)

弧一湯-一一一-一，~一~~-一啟一歡怕洲川斗.洲翔釗劉叫才魂﹃公帶會(huì)r.巴﹁…!，.一爵杯-價(jià)性時(shí)飛一豁產(chǎn)悶‘口價(jià)幼斌落。士作訓(xùn)，，.哥孚二幾幾~~~!!!翩砂:，;;;科習(xí)2.7%哎公的麟乞__，、點(diǎn)!!父龜卿!夢(mèng)藍(lán)幻O之勺妙氣r)辮勺l{只，_，介‘愁介乙A.B.圖1Fl供鼠來(lái)源異體反應(yīng)性NK細(xì)胞的流式檢測(cè)A.FI供鼠的脾臟細(xì)胞散點(diǎn)圖;B.FI供鼠脾細(xì)胞中能特異性識(shí)別并殺傷C57細(xì)胞的Ly49A+NK細(xì)胞亞群(Allo一NK細(xì)胞);

小鼠淋巴細(xì)胞無(wú)殺傷活性。3、移植后不同時(shí)間點(diǎn)骨髓、脾臟供體細(xì)胞嵌合率的比較移植后3個(gè)月內(nèi)脾臟與骨髓供體細(xì)胞的嵌合率檢測(cè)如表1、表2及圖3、圖4所示，化療組與化療加NK組脾臟中的嵌合率在移植后第7天及21天以后的兩個(gè)月內(nèi)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，尸<0.05，在三個(gè)月的時(shí)候仍有差別;化療組和化療加NK組之間骨髓中的嵌合率在2個(gè)月內(nèi)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P<0.05，而在三個(gè)月的時(shí)候沒(méi)有差別。此差異表現(xiàn)為無(wú)論在脾臟還是骨髓，化療加NK組中供體的細(xì)胞比例均高于化療組。表1移植后不同時(shí)間點(diǎn)脾臟中供體細(xì)胞嵌合率的比較(x幻，%)化療組化療加NK組 21.90士3.10 18.60士3.89 1.40士0.43 7.50士0.70 9.36士3

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]低劑量氟達(dá)拉濱、環(huán)磷酰胺聯(lián)合供者NK細(xì)胞作為非清髓性預(yù)處理用于小鼠單倍相合造血干細(xì)胞移植[J]. 于津浦,曹水,辛寧,安秀梅,齊靜,任秀寶.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2007(05)
[2]樹(shù)突狀細(xì)胞與移植免疫[J]. 杜雋銘,全志偉,單根法.  肝臟. 2004(02)
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