人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為造血干/祖細(xì)胞及低氧對(duì)分化過(guò)程的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-01-26 02:41
背景造血干/祖細(xì)胞可重建骨髓的造血及免疫功能,在重建患者的短期造血功能及長(zhǎng)期造血功能方面均具有明顯作用。臨床上造血干/祖細(xì)胞移植現(xiàn)在多來(lái)源于臍血,然而由于臍血的數(shù)量有限,而且存在免疫排斥的風(fēng)險(xiǎn),因此,造血干/祖細(xì)胞的體外誘導(dǎo)分化提供了一種嶄新的來(lái)源。誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cell,iPS細(xì)胞)因其具有多能干細(xì)胞的特性,而且具有多種分化潛能,使其成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。iPS細(xì)胞能夠在體外分化為各種體細(xì)胞,并且因?yàn)閕PS細(xì)胞是自身體細(xì)胞重編程而來(lái)的,不存在免疫排斥的問(wèn)題,在倫理上也更能夠被大家所接受,體外誘導(dǎo)能夠得到患者自身的造血干/祖細(xì)胞進(jìn)行骨髓移植。所以如何在體外將iPS細(xì)胞高效的分化為造血干/祖細(xì)胞成為大家關(guān)注的焦點(diǎn)。多能干細(xì)胞已經(jīng)證實(shí)可以分化為造血干/祖細(xì)胞,誘導(dǎo)多能干細(xì)胞分化為造血干細(xì)胞的方法目前可以分為三種:一、細(xì)胞因子單層誘導(dǎo),二、iPS細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng),三、EB(擬胚體)培養(yǎng)誘導(dǎo)分化。本實(shí)驗(yàn)選用的體外誘導(dǎo)分化體系是iPS細(xì)胞與小鼠骨髓間充質(zhì)細(xì)胞OP9共培養(yǎng)的方法。低氧環(huán)境的存在可以調(diào)控造血相關(guān)因子的表達(dá)和分布,進(jìn)而參與到后續(xù)...
【文章來(lái)源】:濟(jì)南大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
研究生導(dǎo)師及課題小組成員簡(jiǎn)介
摘要
ABSTRACT
主要符號(hào)表
前言
材料與方法
1.1 主要材料儀器
1.2 培養(yǎng)基和試劑的配置方法
1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
1.4 iPS 細(xì)胞與 OP9 共培養(yǎng)進(jìn)行造血分化
1.5 免疫磁珠法分選 CD34+細(xì)胞
1.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)造血分化效率
1.7 集落形成實(shí)驗(yàn)
1.8 分離臍血 CD34+細(xì)胞
1.9 RNA 提取和 cDNA 逆轉(zhuǎn)錄及 Q-PCR
1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
結(jié)果
2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)與形態(tài)觀察
2.2 在體外誘導(dǎo) iPS 細(xì)胞向造血分化
2.3 流式檢測(cè)
2.4 Q-PCR 檢測(cè)共培養(yǎng)過(guò)程中各種相關(guān)基因的表達(dá)變化
2.5 CD34+細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Expansive effects of aorta-gonad-mesonephros-derived stromal cells on hematopoietic stem cells from embryonic stem cells[J]. FU Jin-rong, LIU Wen-li, ZHOU Yu-feng, ZHOU Jian-feng, SUN Han-ying, LUO Li, ZHANG Heng and XU Hui-zhen Department of Hematology, Tongji Hospital, Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China. Chinese Medical Journal. 2005(23)
[2]CD34分子及其單克隆抗體應(yīng)用[J]. 任素萍,奚永志. 中國(guó)輸血雜志. 2003(05)
本文編號(hào):3000325
【文章來(lái)源】:濟(jì)南大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
研究生導(dǎo)師及課題小組成員簡(jiǎn)介
摘要
ABSTRACT
主要符號(hào)表
前言
材料與方法
1.1 主要材料儀器
1.2 培養(yǎng)基和試劑的配置方法
1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
1.4 iPS 細(xì)胞與 OP9 共培養(yǎng)進(jìn)行造血分化
1.5 免疫磁珠法分選 CD34+細(xì)胞
1.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)造血分化效率
1.7 集落形成實(shí)驗(yàn)
1.8 分離臍血 CD34+細(xì)胞
1.9 RNA 提取和 cDNA 逆轉(zhuǎn)錄及 Q-PCR
1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
結(jié)果
2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)與形態(tài)觀察
2.2 在體外誘導(dǎo) iPS 細(xì)胞向造血分化
2.3 流式檢測(cè)
2.4 Q-PCR 檢測(cè)共培養(yǎng)過(guò)程中各種相關(guān)基因的表達(dá)變化
2.5 CD34+細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Expansive effects of aorta-gonad-mesonephros-derived stromal cells on hematopoietic stem cells from embryonic stem cells[J]. FU Jin-rong, LIU Wen-li, ZHOU Yu-feng, ZHOU Jian-feng, SUN Han-ying, LUO Li, ZHANG Heng and XU Hui-zhen Department of Hematology, Tongji Hospital, Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China. Chinese Medical Journal. 2005(23)
[2]CD34分子及其單克隆抗體應(yīng)用[J]. 任素萍,奚永志. 中國(guó)輸血雜志. 2003(05)
本文編號(hào):3000325
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