Calpastatin在大鼠離體心臟缺血/再灌注損傷時表達的改變
發(fā)布時間:2021-01-24 16:36
前言Calpastatin(鈣蛋白酶抑素)是鈣激活蛋白水解酶calpain(鈣蛋白酶)的內(nèi)源性特異性阻滯劑,由N末端的非同源序列L區(qū)和120-140個氨基酸殘基的4個重復序列1、2、3、4區(qū)(domain 1、2、3、4)構成的蛋白質(zhì)。Domain 1-4承擔calpain阻滯作用,然而,結構域L(domain L)卻沒有任何calpain阻滯作用,長期以來被稱為是功能不明的結構域。我們最近的研究發(fā)現(xiàn)calpastatin還有鈣通道活化作用,而且domain L單獨也具有鈣通道活化作用,說明calpastatin的鈣通道活化作用可能是由domain L來承擔的,并提出了calpastatin的雙重作用假說:一方面活化鈣離子通道使鈣內(nèi)流增加(domain L承擔),另一方面又抑制鈣激活的蛋白水解酶calpain (domain1-4承擔)。然而,關于domain L的病理生理學作用及意義目前尚無任何研究報道。缺血/再灌注(isehemia reperfusion, I/R)損傷是指在缺血的基礎上恢復血流后,組織器官的損傷反而加重的現(xiàn)象。隨著休克治療的進步以及溶栓療法、動脈搭橋術、心肺腦復...
【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:43 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
RT一PeR法檢測心肌缺血/再灌時ealpastatin的domain一Zm洲A表達情況
6Omin組下降至表達有所恢復,但再灌注30min時domain3一 4mRNA水平再次下降。見圖4。 domain34 461bPse」卜p一actin 350bPes日卜‘!倒oel專門公u一e三 P50o圖4,RT一PeR法檢測心肌缺血/再灌時ealpastatin的domain3并mRNA表達情況*尸 <0.05,**尸<0.01。3、westem一blot法檢測缺血/再灌時calpastatin蛋白表達取loomg總蛋白,用考馬斯亮藍法蛋白定量。將測得的光密度值數(shù)據(jù)用Excell軟件處理后,繪制標準蛋白曲線,得到的標準曲線回歸方程為y=0.olx+0.0055,擴一0.9856。根據(jù)方程計算出樣品蛋白含量,蛋白上樣量均為50林g見圖5。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]鈣蛋白酶與肝損傷[J]. 于英男,李燕. 中國藥理學通報. 2008(06)
[2]心肌肌鈣蛋白Ⅰ的磷酸化與非磷酸化調(diào)節(jié)[J]. 張琳,余志斌. 生理科學進展. 2008(01)
[3]鈣激活蛋白酶與蛋白酶體抑制劑誘導細胞凋亡的機制[J]. 張瑜,常明,韓威,胡軼虹,王秋艷,胡林森. 中國老年學雜志. 2008(01)
[4]鈣蛋白酶和鈣蛋白酶抑素在老年聾大鼠耳蝸中的表達[J]. 王蘋,湯勇,杜波,杜寶東,肖北春. 中國老年學雜志. 2006(10)
[5]缺血再灌注損傷的病理生理、臨床表現(xiàn)和預防[J]. 郁麗娜,謝俊然,段滿林. 國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊. 2002(01)
[6]Calpain抑制劑-1對大鼠急性缺血再灌注誘導心肌細胞凋亡的影響[J]. 徐冬梅,劉正湘. 中國組織化學與細胞化學雜志. 2001(02)
[7]依鈣蛋白酶及其抑制劑的研究近況[J]. 隋立森,張相彤,劉恩重,戴欽舜. 哈爾濱醫(yī)科大學學報. 2000(03)
[8]缺血/再灌注對心室肌細胞膜離子通道的影響[J]. 鄒路蕓,蔣文平. 中國心臟起搏與心電生理雜志. 1999(04)
[9]鈣蛋白酶的結構及活性調(diào)節(jié)[J]. 杜敏,南慶賢,朱美君. 生物化學與生物物理進展. 1998(01)
本文編號:2997573
【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:43 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
RT一PeR法檢測心肌缺血/再灌時ealpastatin的domain一Zm洲A表達情況
6Omin組下降至表達有所恢復,但再灌注30min時domain3一 4mRNA水平再次下降。見圖4。 domain34 461bPse」卜p一actin 350bPes日卜‘!倒oel專門公u一e三 P50o圖4,RT一PeR法檢測心肌缺血/再灌時ealpastatin的domain3并mRNA表達情況*尸 <0.05,**尸<0.01。3、westem一blot法檢測缺血/再灌時calpastatin蛋白表達取loomg總蛋白,用考馬斯亮藍法蛋白定量。將測得的光密度值數(shù)據(jù)用Excell軟件處理后,繪制標準蛋白曲線,得到的標準曲線回歸方程為y=0.olx+0.0055,擴一0.9856。根據(jù)方程計算出樣品蛋白含量,蛋白上樣量均為50林g見圖5。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]鈣蛋白酶與肝損傷[J]. 于英男,李燕. 中國藥理學通報. 2008(06)
[2]心肌肌鈣蛋白Ⅰ的磷酸化與非磷酸化調(diào)節(jié)[J]. 張琳,余志斌. 生理科學進展. 2008(01)
[3]鈣激活蛋白酶與蛋白酶體抑制劑誘導細胞凋亡的機制[J]. 張瑜,常明,韓威,胡軼虹,王秋艷,胡林森. 中國老年學雜志. 2008(01)
[4]鈣蛋白酶和鈣蛋白酶抑素在老年聾大鼠耳蝸中的表達[J]. 王蘋,湯勇,杜波,杜寶東,肖北春. 中國老年學雜志. 2006(10)
[5]缺血再灌注損傷的病理生理、臨床表現(xiàn)和預防[J]. 郁麗娜,謝俊然,段滿林. 國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊. 2002(01)
[6]Calpain抑制劑-1對大鼠急性缺血再灌注誘導心肌細胞凋亡的影響[J]. 徐冬梅,劉正湘. 中國組織化學與細胞化學雜志. 2001(02)
[7]依鈣蛋白酶及其抑制劑的研究近況[J]. 隋立森,張相彤,劉恩重,戴欽舜. 哈爾濱醫(yī)科大學學報. 2000(03)
[8]缺血/再灌注對心室肌細胞膜離子通道的影響[J]. 鄒路蕓,蔣文平. 中國心臟起搏與心電生理雜志. 1999(04)
[9]鈣蛋白酶的結構及活性調(diào)節(jié)[J]. 杜敏,南慶賢,朱美君. 生物化學與生物物理進展. 1998(01)
本文編號:2997573
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