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Calpastatin在大鼠離體心臟缺血/再灌注損傷時表達的改變

發(fā)布時間:2021-01-24 16:36
  前言Calpastatin(鈣蛋白酶抑素)是鈣激活蛋白水解酶calpain(鈣蛋白酶)的內(nèi)源性特異性阻滯劑,由N末端的非同源序列L區(qū)和120-140個氨基酸殘基的4個重復序列1、2、3、4區(qū)(domain 1、2、3、4)構成的蛋白質(zhì)。Domain 1-4承擔calpain阻滯作用,然而,結構域L(domain L)卻沒有任何calpain阻滯作用,長期以來被稱為是功能不明的結構域。我們最近的研究發(fā)現(xiàn)calpastatin還有鈣通道活化作用,而且domain L單獨也具有鈣通道活化作用,說明calpastatin的鈣通道活化作用可能是由domain L來承擔的,并提出了calpastatin的雙重作用假說:一方面活化鈣離子通道使鈣內(nèi)流增加(domain L承擔),另一方面又抑制鈣激活的蛋白水解酶calpain (domain1-4承擔)。然而,關于domain L的病理生理學作用及意義目前尚無任何研究報道。缺血/再灌注(isehemia reperfusion, I/R)損傷是指在缺血的基礎上恢復血流后,組織器官的損傷反而加重的現(xiàn)象。隨著休克治療的進步以及溶栓療法、動脈搭橋術、心肺腦復... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】:43 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

Calpastatin在大鼠離體心臟缺血/再灌注損傷時表達的改變


RT一PeR法檢測心肌缺血/再灌時ealpastatin的domain一Zm洲A表達情況

曲線,心肌缺血,情況,曲線回歸方程


6Omin組下降至表達有所恢復,但再灌注30min時domain3一 4mRNA水平再次下降。見圖4。 domain34 461bPse」卜p一actin 350bPes日卜‘!倒oel專門公u一e三 P50o圖4,RT一PeR法檢測心肌缺血/再灌時ealpastatin的domain3并mRNA表達情況*尸 <0.05,**尸<0.01。3、westem一blot法檢測缺血/再灌時calpastatin蛋白表達取loomg總蛋白,用考馬斯亮藍法蛋白定量。將測得的光密度值數(shù)據(jù)用Excell軟件處理后,繪制標準蛋白曲線,得到的標準曲線回歸方程為y=0.olx+0.0055,擴一0.9856。根據(jù)方程計算出樣品蛋白含量,蛋白上樣量均為50林g見圖5。

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]鈣激活蛋白酶與蛋白酶體抑制劑誘導細胞凋亡的機制[J]. 張瑜,常明,韓威,胡軼虹,王秋艷,胡林森.  中國老年學雜志. 2008(01)
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本文編號:2997573

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