Calpastatin在大鼠離體心臟缺血/再灌注損傷時(shí)表達(dá)的改變
發(fā)布時(shí)間:2021-01-24 16:36
前言Calpastatin(鈣蛋白酶抑素)是鈣激活蛋白水解酶calpain(鈣蛋白酶)的內(nèi)源性特異性阻滯劑,由N末端的非同源序列L區(qū)和120-140個(gè)氨基酸殘基的4個(gè)重復(fù)序列1、2、3、4區(qū)(domain 1、2、3、4)構(gòu)成的蛋白質(zhì)。Domain 1-4承擔(dān)calpain阻滯作用,然而,結(jié)構(gòu)域L(domain L)卻沒有任何calpain阻滯作用,長(zhǎng)期以來被稱為是功能不明的結(jié)構(gòu)域。我們最近的研究發(fā)現(xiàn)calpastatin還有鈣通道活化作用,而且domain L單獨(dú)也具有鈣通道活化作用,說明calpastatin的鈣通道活化作用可能是由domain L來承擔(dān)的,并提出了calpastatin的雙重作用假說:一方面活化鈣離子通道使鈣內(nèi)流增加(domain L承擔(dān)),另一方面又抑制鈣激活的蛋白水解酶calpain (domain1-4承擔(dān))。然而,關(guān)于domain L的病理生理學(xué)作用及意義目前尚無(wú)任何研究報(bào)道。缺血/再灌注(isehemia reperfusion, I/R)損傷是指在缺血的基礎(chǔ)上恢復(fù)血流后,組織器官的損傷反而加重的現(xiàn)象。隨著休克治療的進(jìn)步以及溶栓療法、動(dòng)脈搭橋術(shù)、心肺腦復(fù)...
【文章來源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
RT一PeR法檢測(cè)心肌缺血/再灌時(shí)ealpastatin的domain一Zm洲A表達(dá)情況
6Omin組下降至表達(dá)有所恢復(fù),但再灌注30min時(shí)domain3一 4mRNA水平再次下降。見圖4。 domain34 461bPse」卜p一actin 350bPes日卜‘!倒oel專門公u一e三 P50o圖4,RT一PeR法檢測(cè)心肌缺血/再灌時(shí)ealpastatin的domain3并mRNA表達(dá)情況*尸 <0.05,**尸<0.01。3、westem一blot法檢測(cè)缺血/再灌時(shí)calpastatin蛋白表達(dá)取loomg總蛋白,用考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量。將測(cè)得的光密度值數(shù)據(jù)用Excell軟件處理后,繪制標(biāo)準(zhǔn)蛋白曲線,得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.olx+0.0055,擴(kuò)一0.9856。根據(jù)方程計(jì)算出樣品蛋白含量,蛋白上樣量均為50林g見圖5。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鈣蛋白酶與肝損傷[J]. 于英男,李燕. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2008(06)
[2]心肌肌鈣蛋白Ⅰ的磷酸化與非磷酸化調(diào)節(jié)[J]. 張琳,余志斌. 生理科學(xué)進(jìn)展. 2008(01)
[3]鈣激活蛋白酶與蛋白酶體抑制劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制[J]. 張瑜,常明,韓威,胡軼虹,王秋艷,胡林森. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2008(01)
[4]鈣蛋白酶和鈣蛋白酶抑素在老年聾大鼠耳蝸中的表達(dá)[J]. 王蘋,湯勇,杜波,杜寶東,肖北春. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2006(10)
[5]缺血再灌注損傷的病理生理、臨床表現(xiàn)和預(yù)防[J]. 郁麗娜,謝俊然,段滿林. 國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè). 2002(01)
[6]Calpain抑制劑-1對(duì)大鼠急性缺血再灌注誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的影響[J]. 徐冬梅,劉正湘. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2001(02)
[7]依鈣蛋白酶及其抑制劑的研究近況[J]. 隋立森,張相彤,劉恩重,戴欽舜. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(03)
[8]缺血/再灌注對(duì)心室肌細(xì)胞膜離子通道的影響[J]. 鄒路蕓,蔣文平. 中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志. 1999(04)
[9]鈣蛋白酶的結(jié)構(gòu)及活性調(diào)節(jié)[J]. 杜敏,南慶賢,朱美君. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1998(01)
本文編號(hào):2997573
【文章來源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
RT一PeR法檢測(cè)心肌缺血/再灌時(shí)ealpastatin的domain一Zm洲A表達(dá)情況
6Omin組下降至表達(dá)有所恢復(fù),但再灌注30min時(shí)domain3一 4mRNA水平再次下降。見圖4。 domain34 461bPse」卜p一actin 350bPes日卜‘!倒oel專門公u一e三 P50o圖4,RT一PeR法檢測(cè)心肌缺血/再灌時(shí)ealpastatin的domain3并mRNA表達(dá)情況*尸 <0.05,**尸<0.01。3、westem一blot法檢測(cè)缺血/再灌時(shí)calpastatin蛋白表達(dá)取loomg總蛋白,用考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量。將測(cè)得的光密度值數(shù)據(jù)用Excell軟件處理后,繪制標(biāo)準(zhǔn)蛋白曲線,得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.olx+0.0055,擴(kuò)一0.9856。根據(jù)方程計(jì)算出樣品蛋白含量,蛋白上樣量均為50林g見圖5。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鈣蛋白酶與肝損傷[J]. 于英男,李燕. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2008(06)
[2]心肌肌鈣蛋白Ⅰ的磷酸化與非磷酸化調(diào)節(jié)[J]. 張琳,余志斌. 生理科學(xué)進(jìn)展. 2008(01)
[3]鈣激活蛋白酶與蛋白酶體抑制劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制[J]. 張瑜,常明,韓威,胡軼虹,王秋艷,胡林森. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2008(01)
[4]鈣蛋白酶和鈣蛋白酶抑素在老年聾大鼠耳蝸中的表達(dá)[J]. 王蘋,湯勇,杜波,杜寶東,肖北春. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2006(10)
[5]缺血再灌注損傷的病理生理、臨床表現(xiàn)和預(yù)防[J]. 郁麗娜,謝俊然,段滿林. 國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè). 2002(01)
[6]Calpain抑制劑-1對(duì)大鼠急性缺血再灌注誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的影響[J]. 徐冬梅,劉正湘. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2001(02)
[7]依鈣蛋白酶及其抑制劑的研究近況[J]. 隋立森,張相彤,劉恩重,戴欽舜. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(03)
[8]缺血/再灌注對(duì)心室肌細(xì)胞膜離子通道的影響[J]. 鄒路蕓,蔣文平. 中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志. 1999(04)
[9]鈣蛋白酶的結(jié)構(gòu)及活性調(diào)節(jié)[J]. 杜敏,南慶賢,朱美君. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1998(01)
本文編號(hào):2997573
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