目的:探討丹黃明目湯對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變激光術(shù)后大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表達(dá)的影響。方法:采用鏈脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射誘發(fā)大鼠糖尿病視網(wǎng)膜病變模型,并將造模成功的80只大鼠隨機(jī)分為激光造模組（60只）、D組（20只）;激光造模組應(yīng)用532氬激光對(duì)大鼠行全視網(wǎng)膜激光光凝治療,可見明顯激光斑形成即為激光造模成功。大鼠造模成功后隨機(jī)分為A、B、C組。A、B、C組大鼠分別予丹黃明目湯、羥苯磺酸鈣混懸液、蒸餾水灌胃,D組大鼠予蒸餾水灌胃。給藥前后分別觀察眼底,采用RT-PCR、Western-blotting法檢測(cè)VEGF的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:RT-PCR顯示A組大鼠VEGF的表達(dá)水平顯著低于B組、C組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Western-blotting蛋白印跡示蹤法顯示A組大鼠VEGF表達(dá)明顯低于B組、C組、D組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論:丹黃明目湯可抑制糖尿病視網(wǎng)膜病變激光術(shù)后大鼠VEGF的表達(dá)。 

【文章來源】：中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2019,25(18)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

VEGF基因PCR產(chǎn)物融解曲線

圖.比山

2019年9月第25卷第18期September.2019Vol.25No.18一抗（兔抗∶稀釋比例1∶500，鼠抗∶稀釋比例1∶5000）一起孵育，4℃過夜。孵育結(jié)束，1*TBST洗3次，每次15min。滴加一抗于37℃濕盒內(nèi)孵育2h，PBS漂洗5min×3次。完成后滴加用1*TBST稀釋HRP標(biāo)記的二抗（兔抗∶稀釋比例1∶6000，鼠抗∶稀釋比例1∶5000），將稀釋后的二抗與膜共同孵育90min。孵育結(jié)束，1*TBST洗3次，每次15min。使用ECL化學(xué)發(fā)光液（Thermo）與膜孵育3min，用吸水紙吸盡液體，用保鮮膜包裹雜交膜，在暗盒內(nèi)與X膠片曝光數(shù)秒至數(shù)分鐘；顯影沖洗。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用（x±s）表示，用單因素方差分析，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1RT-PCR檢測(cè)VEGF的表達(dá)情況VEGF基因PCR產(chǎn)物融解曲線峰值在84℃左右為單一峰值，峰形銳利，由此可知，無(wú)非特異性產(chǎn)物，定量準(zhǔn)確（見圖1）。A組大鼠VEGF表達(dá)水平低于B組及C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（圖2、表2）其中每個(gè)實(shí)驗(yàn)均取20只大鼠的單只眼分別提取RNA，進(jìn)行半定量PCR的檢測(cè)，以實(shí)現(xiàn)這一實(shí)驗(yàn)的生物學(xué)重復(fù)，均得到一致結(jié)果。2.2Western-blotting檢測(cè)結(jié)果A組和B組大鼠的VEGFmRNA表達(dá)變化趨勢(shì)較為一致，A組大鼠VEGF表達(dá)明顯低于B組、C組、D組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（見表2、圖3）每個(gè)實(shí)驗(yàn)均選取20只大鼠的單只眼分別進(jìn)行蛋白的提取完成Western-blotting檢測(cè)，以實(shí)現(xiàn)這一實(shí)驗(yàn)的生物學(xué)重復(fù)，均得

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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本文編號(hào)：2982087