目的:探討丹黃明目湯對糖尿病視網膜病變激光術后大鼠血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表達的影響。方法:采用鏈脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射誘發(fā)大鼠糖尿病視網膜病變模型,并將造模成功的80只大鼠隨機分為激光造模組（60只）、D組（20只）;激光造模組應用532氬激光對大鼠行全視網膜激光光凝治療,可見明顯激光斑形成即為激光造模成功。大鼠造模成功后隨機分為A、B、C組。A、B、C組大鼠分別予丹黃明目湯、羥苯磺酸鈣混懸液、蒸餾水灌胃,D組大鼠予蒸餾水灌胃。給藥前后分別觀察眼底,采用RT-PCR、Western-blotting法檢測VEGF的相對表達量。結果:RT-PCR顯示A組大鼠VEGF的表達水平顯著低于B組、C組,差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Western-blotting蛋白印跡示蹤法顯示A組大鼠VEGF表達明顯低于B組、C組、D組,差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論:丹黃明目湯可抑制糖尿病視網膜病變激光術后大鼠VEGF的表達。 

【文章來源】：中醫(yī)藥導報. 2019,25(18)

【文章頁數】：4 頁

【部分圖文】：

VEGF基因PCR產物融解曲線

圖.比山

2019年9月第25卷第18期September.2019Vol.25No.18一抗（兔抗∶稀釋比例1∶500，鼠抗∶稀釋比例1∶5000）一起孵育，4℃過夜。孵育結束，1*TBST洗3次，每次15min。滴加一抗于37℃濕盒內孵育2h，PBS漂洗5min×3次。完成后滴加用1*TBST稀釋HRP標記的二抗（兔抗∶稀釋比例1∶6000，鼠抗∶稀釋比例1∶5000），將稀釋后的二抗與膜共同孵育90min。孵育結束，1*TBST洗3次，每次15min。使用ECL化學發(fā)光液（Thermo）與膜孵育3min，用吸水紙吸盡液體，用保鮮膜包裹雜交膜，在暗盒內與X膠片曝光數秒至數分鐘；顯影沖洗。1.6統(tǒng)計學方法運用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行處理，計量資料用（x±s）表示，用單因素方差分析，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1RT-PCR檢測VEGF的表達情況VEGF基因PCR產物融解曲線峰值在84℃左右為單一峰值，峰形銳利，由此可知，無非特異性產物，定量準確（見圖1）。A組大鼠VEGF表達水平低于B組及C組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（圖2、表2）其中每個實驗均取20只大鼠的單只眼分別提取RNA，進行半定量PCR的檢測，以實現這一實驗的生物學重復，均得到一致結果。2.2Western-blotting檢測結果A組和B組大鼠的VEGFmRNA表達變化趨勢較為一致，A組大鼠VEGF表達明顯低于B組、C組、D組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（見表2、圖3）每個實驗均選取20只大鼠的單只眼分別進行蛋白的提取完成Western-blotting檢測，以實現這一實驗的生物學重復，均得

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]益氣養(yǎng)血通絡法干預糖尿病視網膜病變的臨床與實驗研究[D]. 郭藝娟.中國中醫(yī)科學院 2012

碩士論文
[1]中藥治療糖尿病視網膜病變隨機對照臨床試驗的系統(tǒng)綜述和結局指標建議[D]. 張云皎.北京中醫(yī)藥大學 2016



本文編號：2982087