乙型肝炎病毒（HBV）感染是公認的防治難題�？贵w性藥物是乙型肝炎治療領(lǐng)域的新方向之一。隨著噬菌體展示技術(shù)的發(fā)展，抗體庫的構(gòu)建方案日趨成熟。全人源化乙型肝炎病毒基因工程抗體逐漸成為這一領(lǐng)域的研究熱點。 抗體在保護性免疫過程中起著決定性作用。針對具體抗原表位的抗體才能滿足預防感染或治療的需要。乙型肝炎表面抗原（HBSAg）顆粒表面的PreS1抗原，是與HBV的侵襲密切相關(guān)的抗原表位。人源化高親和力的Pres1抗體，將在抗體藥物治療HBV感染這一領(lǐng)域發(fā)揮作用。 本研究以抗體多樣性的遺傳機制為理論基礎(chǔ)，借助噬菌體展示技術(shù)，以應用于臨床治療為目標，直接介入抗體工程的最前沿，全人源化基因工程抗體中的單鏈抗體。結(jié)合保護性免疫的最新進展，針對乙型肝炎病毒表位Pres1，為獲得抗體性藥物作了前期研究工作。 本研究以健康供血者的外周血淋巴細胞為來源，部分以偶聯(lián)BSA的PreS1肽體外免疫后，分別提取總RNA，擴增抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)基因，組裝成單鏈抗體（scFv）基因。借助噬菌體展示技術(shù)，平行構(gòu)建了天然及免疫人源單鏈抗體庫。再以PreS1肽進行固相淘選，兩個抗體庫均獲得了PreS1單鏈抗... 

【文章來源】：大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

單鏈抗體展示于噬菌體表面

的噬菌體就構(gòu)成了噬菌體展示抗體庫152.55].攜帶抗體的噬菌體就是噬菌體抗體，它能夠與固相抗原結(jié)合，從而使噬菌體也被固定于固相表面。這就使篩選成為可能156-60〕。圖4、圖5為基因工程抗體展示于噬菌體的示意圖。圖4單鏈抗體展示于噬菌體表面

抗體基因可變區(qū)片段的半套式PCR擴增結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
[1]來自噬菌體抗體庫識別KG1a細胞的scFv5C1的高效表達、純化及其生物學特性[J]. 隋建華,李文輝,姜學英,何一心,宋增璇.  中華微生物學和免疫學雜志. 2001(04)
[2]HBV新型免疫原的設計、合成及免疫原性研究[J]. 吳玉章,劉茂昌,賈正才,鄒麗云.  第三軍醫(yī)大學學報. 2000(10)
[3]乙型肝炎病毒表面抗原人源單鏈可變區(qū)抗體基因的克隆與鑒定[J]. 成軍,鐘彥偉,施雙雙,倪勤,夏小兵,董菁,王剛,劉友昭,王琳,劉妍,楊繼珍,陳菊梅.  肝臟. 2000(03)
[4]生物技術(shù)藥物的最新進展和展望[J]. 湯仲明.  國外醫(yī)藥(合成藥 生化藥 制劑分冊). 2000(02)
[5]人單克隆抗體的研究進展[J]. 袁松范.  國外醫(yī)藥(合成藥 生化藥 制劑分冊). 2000(01)
[6]T7啟動子作用下抗人TNF-α單鏈抗體的表達[J]. 陳萍,鄧健蓓,陳梅紅,韓驊,藥立波,蘇成芝.  生物化學與生物物理進展. 1999(05)
[7]從免疫及天然噬菌體抗體庫中篩選抗rP27Kip1單鏈抗體的研究[J]. 曹躍瓊,喬守怡,袁有忠,黃建生,趙壽元.  中國科學C輯:生命科學. 1999(05)
[8]抗CD4單克隆抗體可變區(qū)基因克隆及序列分析[J]. 朱志剛,沈關(guān)心,王曉林.  免疫學雜志. 1999(02)
[9]基因工程抗體在臨床上的應用[J]. 李光富,唐家琪.  藥物生物技術(shù). 1999(01)
[10]乙肝病毒表面抗原Pre-S1的N端片段溶液構(gòu)象研究[J]. 龔慶國,吳季輝,劉琴,施蘊渝,崔大敷,徐來根,張友尚.  中國科學C輯:生命科學. 1999(01)

博士論文
[1]兩種蝮蛇毒類凝血酶基因的克隆表達與分離純化[D]. 楊青.大連理工大學 2002



本文編號：2966076