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水痘-帶狀皰疹病毒糖蛋白E的原核表達(dá)及免疫反應(yīng)初步評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2021-01-08 13:57
  目的 用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)水痘-帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)糖蛋白(glycoprotein,g)E胞外區(qū),并初步評(píng)價(jià)其免疫效果。方法 將VZV gE胞外區(qū)經(jīng)密碼子優(yōu)化后,克隆至原核表達(dá)載體pET-48b中,測(cè)序鑒定后,轉(zhuǎn)化進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞BL21(DE3)中,用異丙基硫代β-D-半乳糖苷(isopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG)誘導(dǎo)其在大腸桿菌中表達(dá)。采用SDS-PAGE電泳,通過(guò)免疫印跡試驗(yàn)(western blot,WB)鑒定其特異性。用Ni2+-NTA柱對(duì)目的蛋白進(jìn)行純化并復(fù)性后,免疫Balb/c小鼠,用ELISA法檢測(cè)小鼠血清的特異性及效價(jià)。結(jié)果 以包涵體的形式成功表達(dá)了VZV gE胞外區(qū),純化復(fù)性后純度約為90%。WB鑒定其具有良好的免疫反應(yīng)性。免疫小鼠后可產(chǎn)生與商品化水痘減毒活疫苗水平相當(dāng)?shù)奶禺愋钥贵w。結(jié)論 原核表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)VZV gE并評(píng)價(jià)其誘導(dǎo)機(jī)體特異性免疫反應(yīng)的能力,為VZV疫苗的研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。 

【文章來(lái)源】:國(guó)際病毒學(xué)雜志. 2019,(02)

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國(guó)六省市12例水痘-帶狀皰疹患者病毒糖蛋白E基因的序列特征分析[J]. 吳秋華,許松濤,齊夢(mèng)緣,牟君杰,李崇山,陳萌,周劍慧,鄭煥英,何吉蘭,許文波.  病毒學(xué)報(bào). 2018(06)
[2]帶狀皰疹減毒活疫苗安全性及免疫原性評(píng)價(jià)[J]. 石瑋,易應(yīng)磊,劉芬,董金蓉,陳則.  國(guó)際生物制品學(xué)雜志. 2017 (06)
[3]水痘疫苗經(jīng)皮內(nèi)及皮下途徑接種后免疫效果觀察[J]. 江海波,王甦.  臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志. 2017(53)



本文編號(hào):2964718

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