發(fā)布時(shí)間：2021-01-08 13:57

　　目的 用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)水痘-帶狀皰疹病毒（varicella-zoster virus,VZV）糖蛋白（glycoprotein,g）E胞外區(qū),并初步評價(jià)其免疫效果。方法 將VZV gE胞外區(qū)經(jīng)密碼子優(yōu)化后,克隆至原核表達(dá)載體pET-48b中,測序鑒定后,轉(zhuǎn)化進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞BL21（DE3）中,用異丙基硫代β-D-半乳糖苷（isopropyl β-D-thiogalactoside,IPTG）誘導(dǎo)其在大腸桿菌中表達(dá)。采用SDS-PAGE電泳,通過免疫印跡試驗(yàn)（western blot,WB）鑒定其特異性。用Ni2+-NTA柱對目的蛋白進(jìn)行純化并復(fù)性后,免疫Balb/c小鼠,用ELISA法檢測小鼠血清的特異性及效價(jià)。結(jié)果 以包涵體的形式成功表達(dá)了VZV gE胞外區(qū),純化復(fù)性后純度約為90%。WB鑒定其具有良好的免疫反應(yīng)性。免疫小鼠后可產(chǎn)生與商品化水痘減毒活疫苗水平相當(dāng)?shù)奶禺愋钥贵w。結(jié)論 原核表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)VZV gE并評價(jià)其誘導(dǎo)機(jī)體特異性免疫反應(yīng)的能力,為VZV疫苗的研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。 

【文章來源】：國際病毒學(xué)雜志. 2019,(02)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國六省市12例水痘-帶狀皰疹患者病毒糖蛋白E基因的序列特征分析[J]. 吳秋華,許松濤,齊夢緣,牟君杰,李崇山,陳萌,周劍慧,鄭煥英,何吉蘭,許文波.  病毒學(xué)報(bào). 2018(06)
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本文編號：2964718