基因治療研究已成為近十年來醫(yī)學(xué)生物學(xué)界的一項(xiàng)熱點(diǎn)研究課題。雖然已取得很大進(jìn)展，但仍存在一些問題亟待解決，其中靶細(xì)胞的選擇便是影響基因治療效果的關(guān)鍵問題之一。 隨著對皮膚角朊細(xì)胞研究的深入和發(fā)展，人們已發(fā)現(xiàn)角朊細(xì)胞具有許多未曾被認(rèn)識(shí)到的功能和活性，它除了符合基因治療中靶細(xì)胞的基本條件外，還具有許多其它類型靶細(xì)胞所不具備的優(yōu)點(diǎn)，如取材方便，容易獲得，易于回植，便于觀察和調(diào)控基因表達(dá)情況及不良反應(yīng)，且角朊細(xì)胞本身就能分泌一些細(xì)胞因子和生長因子，因而表皮被認(rèn)為是一種理想的靶器官，以角朊細(xì)胞作為靶細(xì)胞進(jìn)行基因治療的設(shè)想也隨之誕生，并受到了生物學(xué)界的重視，這一技術(shù)被稱為角朊細(xì)胞基因治療（Keratinocyte gene therapy）。 為研究角朊細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染的可行性，本實(shí)驗(yàn)擬進(jìn)行①正常人皮膚角朊細(xì)胞的分離、原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)，觀察角朊細(xì)胞的生長特性及代謝活性，為基因轉(zhuǎn)染做好靶細(xì)胞準(zhǔn)備；②β-半乳糖苷酶（β-gal）、綠色熒光蛋白（EGFP）基因轉(zhuǎn)染角朊細(xì)胞的瞬時(shí)表達(dá)檢測；③人白細(xì)胞介素2（IL-2）基因轉(zhuǎn)染角朊細(xì)胞的穩(wěn)定表達(dá)檢測。 實(shí)驗(yàn)中用胰酶消化法分離正常人皮膚角朊細(xì)胞，... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【圖文】：

pSLxe娜一pgal質(zhì)粒

第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文第二部分p一gal、EGFP基因轉(zhuǎn)染角阮細(xì)施的瞬時(shí)表達(dá)檢瀏一材樸和方法--().實(shí)臉材料1.質(zhì)拉、菌種:pSLxCMv.pgal質(zhì)拉(圖4)及HB101由本校病理教研室朱明華教授惠時(shí)，;該質(zhì)粒在載體psLxCMv的B田mHI和眾oI之間插入一段3，3kb的p·gal序列;pEGF-PN3質(zhì)粒(圖5)由本室趙利軍博士惠時(shí)(aontechLaboratones，nIc產(chǎn)品)，該質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)后，可發(fā)出綠色熒光.


本文編號(hào)：2961703