目的：建立具有人免疫學(xué)特性的NOD/SCID小鼠模型；制備膀胱腫瘤EJ細(xì)胞裂解物致敏的DC疫苗,將其應(yīng)用于具有人免疫學(xué)特性的荷人膀胱癌NOD/SCID小鼠進(jìn)行膀胱癌的治療,分析評價(jià)DC疫苗在模型小鼠體內(nèi)抗膀胱癌的生物學(xué)效應(yīng),為DC疫苗治療膀胱癌提供新的思路和理論基礎(chǔ)。方法：第一部分：人免疫重建NOD/SCID小鼠模型的建立及其鑒定1.將經(jīng)過滲漏篩查的16只正常NOD/SCID小鼠隨機(jī)分為2組：實(shí)驗(yàn)組8只,每只腹腔注射人PBMC 4×107/0.5ml,作為人免疫重建組；對照組8只,每只腹腔注射0.5ml無菌PBS,作為空白對照組。2.從生物學(xué)特性和免疫學(xué)特性兩個(gè)方面對小鼠模型進(jìn)行鑒定：觀察小鼠的生物學(xué)體征；第4周、8周、12周分別收集兩組小鼠外周血、脾臟、肝臟：利用流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠血中人CD3+T、CD19+B淋巴細(xì)胞；通過免疫組織化學(xué)染色的方法檢測小鼠脾臟和肝臟組織中人CD3+T、CD19+B淋巴細(xì)胞的浸潤情況；通過ELISA實(shí)驗(yàn)測定小鼠血中人IgG蛋白的含量。第二部分：EJ致敏的DC對人免疫重建荷人膀胱癌NOD/SCID小鼠的抗腫瘤作用1.利用細(xì)胞因子rhGM-CSF、rhIL-... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常狀態(tài)下未發(fā)生GVHD的NOD/sCID小鼠小鼠免疫滲漏現(xiàn)象的檢測

實(shí)驗(yàn)選用的16只4一6周齡NOD/SCID小鼠，其外周血血清中鼠IgG含量均低于5卜留ml(圖3)，由此表明無免疫滲漏現(xiàn)象。 5040302010侖E︸6幾︶。日鑫叭滋理夕/勺10， 11213141516圖3全部小鼠外周血lgG含量

3.5免疫組織化學(xué)檢測小鼠脾臟和肝臟中人的淋巴細(xì)胞移植人PBMC4周后免疫組織化學(xué)染色和光學(xué)顯微鏡觀察顯示:在實(shí)驗(yàn)組NOD/SCID小鼠脾臟組織中存在人CD3+T、CD19+B細(xì)胞(圖5)，但在小鼠肝臟組織中未檢測到人CD3+T、CD19+B細(xì)胞(圖5);對照組 NOD/sCID小鼠在脾臟和肝臟中均未見人CD3十T、 CD19+B陽性標(biāo)一記的細(xì)胞，因此亦可排除非特異性染色或抗原和抗體的交叉反應(yīng)。只孚樂口鄉(xiāng)哮‘:一毛擴(kuò){廠協(xié):.口‘，門肝(對照組)肝(實(shí)驗(yàn)組)脾(對照組)脾(實(shí)驗(yàn)組)圖5人化第4周時(shí)兩組小鼠肝、脾人CD3十T、CD19+B細(xì)胞浸潤情況

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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