目的研究Wnt10b與骨形態(tài)發(fā)生蛋白9（BMP9）誘導(dǎo)間充質(zhì)干細胞（MSCs）骨向分化的關(guān)系,以及相關(guān)的分子機制。方法利用PCR、Western blot、組織化學(xué)染色等方法,檢測BMP9對Wnt10b表達的影響,以及Wnt10b對BMP9誘導(dǎo)的成骨分化的影響。同時,通過定量PCR、Western blot、油紅O染色、流式細胞術(shù)等,分析Wnt10b影響B(tài)MP9成骨分化誘導(dǎo)作用的可能機制。結(jié)果 Wnt10b在C3H10T1/2、C2C12、MEFs和MC3T3-E1細胞中均有表達,BMP9在C3H10T1/2細胞中上調(diào)Wnt10b的表達水平。Wnt10b增強BMP9在C3H10T1/2細胞中增加OCN蛋白水平和促進鈣鹽沉積的能力,沉默Wnt10b減弱BMP9的作用。Wnt10b并不改變BMP9對細胞周期的影響,但能增強BMP9誘導(dǎo)的Smad1/5/8磷酸化,沉默Wnt10b減弱BMP9對Smad1/5/8磷酸化的促進作用。此外,Wnt10b抑制BMP9在C3H10T1/2細胞中誘導(dǎo)的成脂分化,沉默Wnt10b則促進BMP9的成脂分化誘導(dǎo)作用。結(jié)論 Wnt10b可以促進BMP9誘導(dǎo)的MS... 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報. 2019年10期 北大核心

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 細胞及細胞培養(yǎng)
        1.1.3 試劑
        1.1.4 儀器
    1.2 重組腺病毒的構(gòu)建及轉(zhuǎn)染
    1.3 流式細胞術(shù)周期分析
    1.4 Real-time PCR實驗
    1.5 Western blot實驗
    1.6 礦物質(zhì)沉積實驗
    1.7 油紅O染色
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 BMP9在干細胞中對Wnt10b表達的影響
    2.2 Wnt10b對BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細胞成骨分化的影響
    2.3 BMP9及Wnt10b對C3H10T1/2細胞增殖的影響
    2.4 Wnt10b對BMP9介導(dǎo)的BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響
    2.5 Wnt10b對BMP9誘導(dǎo)C3H10T1/2細胞成脂分化的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨形態(tài)蛋白9誘導(dǎo)干細胞骨向分化與環(huán)氧酶-2及PI3K/Akt的關(guān)系研究[J]. 李洋,陳前昭,邵英,曾于樺,任文艷,劉榮興,何百成.  中國藥理學(xué)通報. 2017(07)
[2]骨碎補含藥血清經(jīng)wnt/β-catenin信號通路對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響[J]. 陳云剛,譚國慶,任維龍,徐展望.  中國藥理學(xué)通報. 2017(06)



本文編號：2949398