糜蛋白酶降解溴氰菊酯的作用及機理研究
發(fā)布時間:2020-12-27 11:30
媒介昆蟲的擬除蟲菊酯抗性已經(jīng)在世界范圍內(nèi)存在,是控制媒介傳染病的一個主要障礙。為闡明媒介昆蟲對擬除蟲菊酯的抗性機制,本實驗室先前已經(jīng)鑒別并報道了一系列擬除蟲菊酯代表種溴氰菊酯抗性相關(guān)基因,其中包括糜蛋白酶基因。其后,通過將糜蛋白酶基因過表達和RNA干涉,進一步證實糜蛋白酶基因上調(diào)是引起溴氰菊酯抗性的原因之一。為進一步研究糜蛋白酶對溴氰菊酯的作用,我們進行糜蛋白酶體外直接催化降解溴氰菊酯實驗,并測定了該酶解反應(yīng)的相關(guān)動力學(xué)參數(shù)。應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀和紫外-可見光分光光度法來檢測糜蛋白酶降解不同濃度(4.96-24.80μM)溴氰菊酯,其定量檢測是通過檢測反應(yīng)體系中溴氰菊酯的減少來實現(xiàn)。溴氰菊酯的糜蛋白酶降解物(含未被降解的溴氰菊酯底物)保留時間分別為37.968 min、37.415min、36.490 min和35.895 min。與NIST質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫比對后發(fā)現(xiàn),37.968 min為未被降解的溴氰菊酯,其余峰為溴氰菊酯的糜蛋白酶降解產(chǎn)物。溴氰菊酯紫外-可見光分光光度法測量的吸收波長為264 nm,其代謝產(chǎn)物吸收波長分別為250 nm和296 nm。應(yīng)用GraphPad Prism...
【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
一. 摘要
1. 中文摘要
2. 英文摘要
二. 正文
1. 前言
2. 材料與方法
3. 結(jié)果
4. 討論
三. 小結(jié)
四. 參考文獻
五. 附錄: 在讀期間已擬發(fā)表的論文
六. 致謝
七. 綜述
【參考文獻】:
期刊論文
[1]消除農(nóng)藥殘留的研究進展[J]. 楊曉云,劉昌波,徐漢虹,王芳. 世界農(nóng)藥. 2005(02)
[2]淡色庫蚊細胞色素P450抗性相關(guān)基因克隆與初步鑒定[J]. 朱昌亮,李建民,田海生,馬磊,李秀蘭,吳觀陵. 中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2000(05)
本文編號:2941668
【文章來源】:南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
一. 摘要
1. 中文摘要
2. 英文摘要
二. 正文
1. 前言
2. 材料與方法
3. 結(jié)果
4. 討論
三. 小結(jié)
四. 參考文獻
五. 附錄: 在讀期間已擬發(fā)表的論文
六. 致謝
七. 綜述
【參考文獻】:
期刊論文
[1]消除農(nóng)藥殘留的研究進展[J]. 楊曉云,劉昌波,徐漢虹,王芳. 世界農(nóng)藥. 2005(02)
[2]淡色庫蚊細胞色素P450抗性相關(guān)基因克隆與初步鑒定[J]. 朱昌亮,李建民,田海生,馬磊,李秀蘭,吳觀陵. 中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2000(05)
本文編號:2941668
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