庚型肝炎病毒（hepatitis G virus,HGV）是新發(fā)現(xiàn)的經(jīng)輸血傳播的單正鏈RNA病毒。HGV與黃病毒科的其它成員，尤其是丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV），具有相似的基因組結(jié)構(gòu)。HGV的開放讀碼框架（open reading frame,ORF）編碼一個(gè)約2900個(gè)氨基酸的蛋白前體，與HCV的蛋白前體在氨基酸水平有25.5％的同源性。HGV除了核心蛋白存在與否仍有爭(zhēng)議外，其前體蛋白在結(jié)構(gòu)上與HCV的C-E1-E2-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B結(jié)構(gòu)非常相似。然而，HGV和HCV在生物學(xué)特點(diǎn)上卻差別顯著。本研究利用已建立的HGV轉(zhuǎn)基因Founder小鼠進(jìn)行傳代培育，獲得了能穩(wěn)定傳代并較高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠品系，提供了一個(gè)可在分子水平、細(xì)胞水平和整體水平研究HGV的有效體系。以該轉(zhuǎn)基因鼠為技術(shù)平臺(tái)，本文亦在HGV體內(nèi)外復(fù)制與表達(dá)、HGV致病性、HGV與HCV復(fù)制和表達(dá)差異及疫苗評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行了系列探討。 一 全長(zhǎng)HGV轉(zhuǎn)基因小鼠的遺傳育種與特性研究 轉(zhuǎn)基因小鼠是病毒研究的有效體系，利用本室克隆出的完整HGV cDNA克... 

【文章來源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

HGvEZ抗原在轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織中的表達(dá)(200又)

第二軍醫(yī)大學(xué)博士論文B圖1一5HGV轉(zhuǎn)基因小鼠常規(guī)病理學(xué)切片觀察(IOOx)Fig.1一5Histologiealfindingsoftransge垃eandnormalmice(100x)A，negativeeontraloflivertissuefromnormallittermate.B，livertissuefromtransgeniemouse東杯—一萬)一—己下獷飛、、贏燦誠(chéng)誦.入!嘛翩汀，礴乳二‘一報(bào)毖潤(rùn)。。~一..熟飛。一、‘泌脾一a抓抓咖翩儷咖咖儷鋤蛔廊癡瓶耐蝙秘姍覷譏楊確確黑黑烈烈)大佇長(zhǎng)份煞價(jià)六言戶萬二東言爪二忿不萬沈二;二二二不下瓜石石萬為\瑟一‘啟秘。~公~概··嘶嘶八森枷騙枷而觸嘛耐赫貼嘛瓢械哪嘛恤標(biāo)耐畫泌、、丁丁:井只幾_幾滋葬蕊一工二五了萬二耳抓忘。潔認(rèn)丈。。積一~一拱一，戶·招r一￡認(rèn)一咫如一護(hù)抽;，性認(rèn)··如如翩耐嘛私樹抓{協(xié)誠(chéng)咖洲翻~娜耐夕獄以啊‘滬卉‘~~~炭炭聯(lián)賈二丫熟二二公之截于二茲拭二么獄甲二蕊三蔽蕊二.元甭一_…井『:、，、扮�！耙惶�、、粼，...。。帕、份八人砂產(chǎn)m衣儷六燈、扮~~一J叭尸沖介。~乃河八甘J詳腳冷公介一~~介~一八，，b孔孔‘.冷鄉(xiāng)雙吧理訓(xùn)華衛(wèi)次翼竺黑獄點(diǎn)淤’渭刃竺牛�？蘧m

~截粉嘴一69KD添~~660圖2一3SDS一PAGE和W已、ternblot分析F19.2一3SDS一PAGEand認(rèn)籠stemblotar、alysesofPPagCdrivenexPressionA.SDS一PAGE.Lanesl一5:E即ressionofsL72o7/pZWNs3;。differenteoneentrationsofMgZ‘(50mmol幾，0.lmmo]幾，lmmol/L，IOmmol/L。20mmol/L);Lane6:MoleeularmassmarkerofhighrangeProtein.B.認(rèn)七sternblot.Lanel:ExPressionofSL72O7/PZW;LaneZ:E卻ressionofsL72o7zpz惻53inLBeontainingsommox幾MgZ十;Lane3:E卻ressionofsL72o7/Pz訓(xùn)53inLBeontaining1ommo一zLMgZ‘2.4HGV一Ns3及GFP融合蛋白在B16細(xì)胞的表達(dá)以含GFP和部分HGv一NS3基因的質(zhì)粒pEGFPNS3/2轉(zhuǎn)染B16細(xì)胞并經(jīng)G418篩選后，在熒光顯微鏡下可見綠色熒光(圖2一4)。該轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株以GFP為報(bào)告基因，表達(dá)GFP一53/2融合蛋白，可作為檢測(cè)小鼠CTL應(yīng)答的刺激細(xì)胞或靶細(xì)胞。圖2一4穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pEGFPNs3/2的B16細(xì)胞發(fā)出的綠色熒光(‘200)Fig.2一4EnhaneedgreenfluoreseentProteininB16celistransfectedwithPlasmidPEGFPNS3/2(“200)2.5小鼠血清抗體的檢測(cè)分別于首次免疫后第2、5、8、11周檢測(cè)重組菌SL72o7幣ZWNs3和對(duì)照菌sL7207/PZW口服免疫的小鼠血清抗HGV一NS3，4次檢測(cè)結(jié)果證明

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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