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弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗免疫效果研究及弓形蟲ROP2-P30基因工程復(fù)合抗原的構(gòu)建

發(fā)布時間:2020-12-09 04:07
  本課題基于本室與復(fù)旦大學(xué)生化與分子生物學(xué)實驗室共同研制成功弓形蟲P30乳酸球菌(Lactococcus lactis/P30)口服疫苗基礎(chǔ)上的延伸工作,在研究的第一部分對弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗的實際免疫效果進(jìn)行考察,第二部分利用基因工程手段構(gòu)建弓形蟲ROP2-P30復(fù)合抗原。 目的:1.課題研究的第一部分觀察弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗(L.lactis/P30)的免疫效果。首先確定L.lactis/P30免疫小鼠產(chǎn)生免疫保護(hù)性的適宜劑量,在此劑量下考查L.lactis/P30口服免疫在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)的體液免疫反應(yīng),以及產(chǎn)生的保護(hù)性效果,進(jìn)一步分析L.lactis/P30口服免疫誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生的細(xì)胞免疫效果和抗體IgG的動態(tài)發(fā)生過程,最后觀察L.lactis/P30口服免疫鼠血清中,細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2及NO分子的變化情況。2.本研究課題的第二部分致力于弓形蟲病復(fù)合型疫苗的研制,以進(jìn)一步提高弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗的免疫保護(hù)性效果。從弓形蟲RH株總DNA中分別克隆棒狀體蛋白ROP2和表面膜蛋白P30基因片段,聯(lián)合克隆至表達(dá)載體pET28b中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pET28b... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:127 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗免疫效果研究及弓形蟲ROP2-P30基因工程復(fù)合抗原的構(gòu)建


免疫鼠血清I所抗體亞類的測定..

小鼠血清,動態(tài)過程,百分?jǐn)?shù),實驗小鼠


‘奮產(chǎn)們沙.弓.,1,二I,二(1)(2)(3)圖1.三組實驗小鼠脾細(xì)胞CDS+亞群流式細(xì)胞檢測圖F19.1.Theresu]tofCDS+Tcellfromthreeexperimentalgroupbyfioweytometerass盯(1).P3O免疫鼠脾細(xì)胞CDS+的百分?jǐn)?shù)(2).gp42免疫對照鼠脾細(xì)胞COS+的百分?jǐn)?shù)(3).生理鹽水對照鼠脾細(xì)胞CDS+的百分?jǐn)?shù)(l).thenumberofeos+Teel一frommieeimmunizedwithP3o(2).thenumberofeos+Teellfrommieeimmunizedwithgp42(3).thenumberoreDs+TeellfrommieeimmunizedwithsalineBM.6饑日刁O洛%日.嘴1、102,奮,l砂.沙呀,夕1,1t)’,O刁1.1.!且...皿!(1)(2)(3)圖2.二組實驗小鼠脾細(xì)胞CD曠亞群流式細(xì)胞檢測圖Fig.ZTheresultofCD4十Teellfromthreeexperimentalgroupbyfioweyrometerassay

血清NO,弓形蟲感染,疫苗


口二七上刀紅,J、炭口匕P,‘八1幾認(rèn)習(xí)1pJU二幾二,二乙共】t組別圖1.實驗鼠血清NO酶法測定結(jié)果(pmol/L)Fig.1.TheresultsofNOintheserafromexPerimentalmieedeteetedbyenZymeassay(pmol/L)3.討論弓形蟲病的治療目前仍無理想的藥物,人類尚無可用的疫苗來預(yù)防弓形蟲感染,而畜牧上所使用的疫苗效果不盡如意〔60]?乖呙缢T導(dǎo)的體液免疫不能完全抑制弓形蟲感染,所以人們著手研制誘導(dǎo)細(xì)胞免疫的疫苗,其目的使通過轉(zhuǎn)移免疫力和增強(qiáng)體內(nèi)非特異性防御機(jī)制以達(dá)到治療的目的。宿主抗弓形蟲感染的獲得性免疫應(yīng)答,主要通過誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生具有多種生物活性的細(xì)胞因子(Cyt。kines

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]弓形蟲RH株速殖子期表達(dá)型cDNA文庫的構(gòu)建及鑒定[J]. 楊秋林,陸惠民,鄔敏辰,黃偉達(dá).  寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報. 2001(02)
[4]外源性一氧化氮對弓形蟲速殖子凋亡的誘導(dǎo)作用[J]. 林京,胡建石,林建銀.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2001(02)
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[10]紫外線減毒弓形蟲ZS1株滋養(yǎng)體在小鼠體內(nèi)的細(xì)胞免疫反應(yīng)[J]. 呂芳麗,鄭煥欽,郭虹,陳觀今.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 1999(06)



本文編號:2906239

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