弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗免疫效果研究及弓形蟲ROP2-P30基因工程復(fù)合抗原的構(gòu)建
發(fā)布時(shí)間:2020-12-09 04:07
本課題基于本室與復(fù)旦大學(xué)生化與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室共同研制成功弓形蟲P30乳酸球菌(Lactococcus lactis/P30)口服疫苗基礎(chǔ)上的延伸工作,在研究的第一部分對(duì)弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗的實(shí)際免疫效果進(jìn)行考察,第二部分利用基因工程手段構(gòu)建弓形蟲ROP2-P30復(fù)合抗原。 目的:1.課題研究的第一部分觀察弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗(L.lactis/P30)的免疫效果。首先確定L.lactis/P30免疫小鼠產(chǎn)生免疫保護(hù)性的適宜劑量,在此劑量下考查L(zhǎng).lactis/P30口服免疫在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)的體液免疫反應(yīng),以及產(chǎn)生的保護(hù)性效果,進(jìn)一步分析L.lactis/P30口服免疫誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生的細(xì)胞免疫效果和抗體IgG的動(dòng)態(tài)發(fā)生過程,最后觀察L.lactis/P30口服免疫鼠血清中,細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2及NO分子的變化情況。2.本研究課題的第二部分致力于弓形蟲病復(fù)合型疫苗的研制,以進(jìn)一步提高弓形蟲P30乳酸球菌口服疫苗的免疫保護(hù)性效果。從弓形蟲RH株總DNA中分別克隆棒狀體蛋白R(shí)OP2和表面膜蛋白P30基因片段,聯(lián)合克隆至表達(dá)載體pET28b中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pET28b...
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:127 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
免疫鼠血清I所抗體亞類的測(cè)定..
‘奮產(chǎn)們沙.弓.,1,二I,二(1)(2)(3)圖1.三組實(shí)驗(yàn)小鼠脾細(xì)胞CDS+亞群流式細(xì)胞檢測(cè)圖F19.1.Theresu]tofCDS+Tcellfromthreeexperimentalgroupbyfioweytometerass盯(1).P3O免疫鼠脾細(xì)胞CDS+的百分?jǐn)?shù)(2).gp42免疫對(duì)照鼠脾細(xì)胞COS+的百分?jǐn)?shù)(3).生理鹽水對(duì)照鼠脾細(xì)胞CDS+的百分?jǐn)?shù)(l).thenumberofeos+Teel一frommieeimmunizedwithP3o(2).thenumberofeos+Teellfrommieeimmunizedwithgp42(3).thenumberoreDs+TeellfrommieeimmunizedwithsalineBM.6饑日刁O洛%日.嘴1、102,奮,l砂.沙呀,夕1,1t)’,O刁1.1.!且...皿!(1)(2)(3)圖2.二組實(shí)驗(yàn)小鼠脾細(xì)胞CD曠亞群流式細(xì)胞檢測(cè)圖Fig.ZTheresultofCD4十Teellfromthreeexperimentalgroupbyfioweyrometerassay
口二七上刀紅,J、炭口匕P,‘八1幾認(rèn)習(xí)1pJU二幾二,二乙共】t組別圖1.實(shí)驗(yàn)鼠血清NO酶法測(cè)定結(jié)果(pmol/L)Fig.1.TheresultsofNOintheserafromexPerimentalmieedeteetedbyenZymeassay(pmol/L)3.討論弓形蟲病的治療目前仍無理想的藥物,人類尚無可用的疫苗來預(yù)防弓形蟲感染,而畜牧上所使用的疫苗效果不盡如意〔60]?乖呙缢T導(dǎo)的體液免疫不能完全抑制弓形蟲感染,所以人們著手研制誘導(dǎo)細(xì)胞免疫的疫苗,其目的使通過轉(zhuǎn)移免疫力和增強(qiáng)體內(nèi)非特異性防御機(jī)制以達(dá)到治療的目的。宿主抗弓形蟲感染的獲得性免疫應(yīng)答,主要通過誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生具有多種生物活性的細(xì)胞因子(Cyt。kines
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]弓形蟲RH株ROP1抗原基因的克隆與表達(dá)[J]. 楊秋林,陸惠民,施宓,黃偉達(dá). 中國(guó)人獸共患病雜志. 2001(05)
[2]弓形蟲p35蛋白的基因克隆及其分子特征[J]. 張仁利,吳少庭,高世同,林敏,呂斌. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2001(04)
[3]弓形蟲RH株速殖子期表達(dá)型cDNA文庫(kù)的構(gòu)建及鑒定[J]. 楊秋林,陸惠民,鄔敏辰,黃偉達(dá). 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào). 2001(02)
[4]外源性一氧化氮對(duì)弓形蟲速殖子凋亡的誘導(dǎo)作用[J]. 林京,胡建石,林建銀. 中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2001(02)
[5]弓形體RH株抗原基因SAG1的擴(kuò)增克隆及鑒定[J]. 周永安,陳觀今,劉彥文,羅樹紅. 山西臨床醫(yī)藥. 2001(04)
[6]弓形蟲復(fù)合抗原基因SAG1/ROP1在大腸桿菌中表達(dá)的初步研究[J]. 陳海峰,陳觀今,郭虹,鄭煥欽,王又紅. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2001(02)
[7]弓形蟲DNA疫苗免疫鼠體內(nèi)重組質(zhì)粒分布的探討[J]. 占國(guó)清,吳少庭,李國(guó)光,高世同,林敏,鄭春福. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(06)
[8]弓形蟲表面抗原P30基因分枝桿菌-大腸桿菌穿梭表達(dá)重組質(zhì)粒的構(gòu)建及序列測(cè)定[J]. 占國(guó)清,吳少庭,李國(guó)光,高世同,林敏,梁駒卿,鄭春福. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(05)
[9]弓形蟲表面抗原P22編碼基因片段的克隆及序列測(cè)定[J]. 高世同,吳少廷,林敏,梁駒卿,占國(guó)清. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(02)
[10]紫外線減毒弓形蟲ZS1株滋養(yǎng)體在小鼠體內(nèi)的細(xì)胞免疫反應(yīng)[J]. 呂芳麗,鄭煥欽,郭虹,陳觀今. 中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 1999(06)
本文編號(hào):2906239
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省
【文章頁(yè)數(shù)】:127 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
免疫鼠血清I所抗體亞類的測(cè)定..
‘奮產(chǎn)們沙.弓.,1,二I,二(1)(2)(3)圖1.三組實(shí)驗(yàn)小鼠脾細(xì)胞CDS+亞群流式細(xì)胞檢測(cè)圖F19.1.Theresu]tofCDS+Tcellfromthreeexperimentalgroupbyfioweytometerass盯(1).P3O免疫鼠脾細(xì)胞CDS+的百分?jǐn)?shù)(2).gp42免疫對(duì)照鼠脾細(xì)胞COS+的百分?jǐn)?shù)(3).生理鹽水對(duì)照鼠脾細(xì)胞CDS+的百分?jǐn)?shù)(l).thenumberofeos+Teel一frommieeimmunizedwithP3o(2).thenumberofeos+Teellfrommieeimmunizedwithgp42(3).thenumberoreDs+TeellfrommieeimmunizedwithsalineBM.6饑日刁O洛%日.嘴1、102,奮,l砂.沙呀,夕1,1t)’,O刁1.1.!且...皿!(1)(2)(3)圖2.二組實(shí)驗(yàn)小鼠脾細(xì)胞CD曠亞群流式細(xì)胞檢測(cè)圖Fig.ZTheresultofCD4十Teellfromthreeexperimentalgroupbyfioweyrometerassay
口二七上刀紅,J、炭口匕P,‘八1幾認(rèn)習(xí)1pJU二幾二,二乙共】t組別圖1.實(shí)驗(yàn)鼠血清NO酶法測(cè)定結(jié)果(pmol/L)Fig.1.TheresultsofNOintheserafromexPerimentalmieedeteetedbyenZymeassay(pmol/L)3.討論弓形蟲病的治療目前仍無理想的藥物,人類尚無可用的疫苗來預(yù)防弓形蟲感染,而畜牧上所使用的疫苗效果不盡如意〔60]?乖呙缢T導(dǎo)的體液免疫不能完全抑制弓形蟲感染,所以人們著手研制誘導(dǎo)細(xì)胞免疫的疫苗,其目的使通過轉(zhuǎn)移免疫力和增強(qiáng)體內(nèi)非特異性防御機(jī)制以達(dá)到治療的目的。宿主抗弓形蟲感染的獲得性免疫應(yīng)答,主要通過誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生具有多種生物活性的細(xì)胞因子(Cyt。kines
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]弓形蟲RH株ROP1抗原基因的克隆與表達(dá)[J]. 楊秋林,陸惠民,施宓,黃偉達(dá). 中國(guó)人獸共患病雜志. 2001(05)
[2]弓形蟲p35蛋白的基因克隆及其分子特征[J]. 張仁利,吳少庭,高世同,林敏,呂斌. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2001(04)
[3]弓形蟲RH株速殖子期表達(dá)型cDNA文庫(kù)的構(gòu)建及鑒定[J]. 楊秋林,陸惠民,鄔敏辰,黃偉達(dá). 寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報(bào). 2001(02)
[4]外源性一氧化氮對(duì)弓形蟲速殖子凋亡的誘導(dǎo)作用[J]. 林京,胡建石,林建銀. 中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2001(02)
[5]弓形體RH株抗原基因SAG1的擴(kuò)增克隆及鑒定[J]. 周永安,陳觀今,劉彥文,羅樹紅. 山西臨床醫(yī)藥. 2001(04)
[6]弓形蟲復(fù)合抗原基因SAG1/ROP1在大腸桿菌中表達(dá)的初步研究[J]. 陳海峰,陳觀今,郭虹,鄭煥欽,王又紅. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2001(02)
[7]弓形蟲DNA疫苗免疫鼠體內(nèi)重組質(zhì)粒分布的探討[J]. 占國(guó)清,吳少庭,李國(guó)光,高世同,林敏,鄭春福. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(06)
[8]弓形蟲表面抗原P30基因分枝桿菌-大腸桿菌穿梭表達(dá)重組質(zhì)粒的構(gòu)建及序列測(cè)定[J]. 占國(guó)清,吳少庭,李國(guó)光,高世同,林敏,梁駒卿,鄭春福. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(05)
[9]弓形蟲表面抗原P22編碼基因片段的克隆及序列測(cè)定[J]. 高世同,吳少廷,林敏,梁駒卿,占國(guó)清. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2000(02)
[10]紫外線減毒弓形蟲ZS1株滋養(yǎng)體在小鼠體內(nèi)的細(xì)胞免疫反應(yīng)[J]. 呂芳麗,鄭煥欽,郭虹,陳觀今. 中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 1999(06)
本文編號(hào):2906239
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