背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（DRG）是外周神經(jīng)系統(tǒng)中感受、傳導(dǎo)痛覺的重要細(xì)胞,多聚賴氨酸是神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)常用的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）,但不同類型、不同濃度的多聚賴氨酸對(duì)背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的具體影響目前仍未闡明。目的:本項(xiàng)目旨在探討不同類型、濃度、分子量的多聚賴氨酸對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的影響。方法:分別從時(shí)間梯度、濃度梯度以及不同分子量這三個(gè)方面研究D型及L型多聚賴氨酸對(duì)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分化率及平均突起長(zhǎng)度的影響。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,正常工作濃度下用L型多聚賴氨酸作為基底材料培養(yǎng)細(xì)胞48 h時(shí)對(duì)細(xì)胞突起長(zhǎng)度有一定的促進(jìn)作用;當(dāng)D型、L型多聚賴氨酸的濃度分別降低至5 g/ml、20 g/ml時(shí),細(xì)胞在L型多聚賴氨酸包被的玻片上分化更好;而普通分子量（3-7 W）或高分子量（>30 W）的D型多聚賴氨酸對(duì)背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)分化無顯著影響。 

【文章來源】：科教導(dǎo)刊(中旬刊). 2019年10期 第81-83頁

【文章頁數(shù)】：3 頁

【部分圖文】：

不同相對(duì)分子質(zhì)量的D-PL對(duì)DRG細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

822019年/第29期/10月（中）取出老鼠脊柱，并沿脊椎剖成兩半，從脊髓側(cè)面取出背根神經(jīng)節(jié)（DRG）。剔凈DRG周圍的組織并充分剪碎至糊狀。將剪碎后的DRG放入2ml消化酶中消化30min，每隔5min拿出來輕輕吹打。取出一滴消化液，放置顯微鏡下觀察，若看到消化成單個(gè)渾圓的細(xì)胞，則停止消化，否則繼續(xù)消化。消化結(jié)束加入3mL培養(yǎng)基，1000g離心3min。棄上清，加適量培養(yǎng)基，重懸。滴片，將細(xì)胞放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2h使其貼壁，待細(xì)胞貼壁后加入培養(yǎng)基培養(yǎng)。1.2.2固定及細(xì)胞成像固定：吸出培養(yǎng)基，每孔加入400l4%的PFA溶液，室溫下固定15min，貼片。細(xì)胞成像：貼片后，每類樣本在激光共聚焦顯微鏡放大60倍下分別隨機(jī)選取6-10個(gè)視野，進(jìn)行成像處理。2結(jié)果2.1常用工作濃度L、D型多聚賴氨酸對(duì)DRG生長(zhǎng)分化的影響本次實(shí)驗(yàn)通過統(tǒng)計(jì)比較DRG細(xì)胞的分化率，平均突起長(zhǎng)度，觀察D型和L型多聚賴氨酸對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的影響。常用工作濃度為100g/ml的L-PL及25g/ml的D-PL，用這些ECM包被玻片，超純水水洗晾干后培養(yǎng)細(xì)胞。當(dāng)某個(gè)細(xì)胞的突起總長(zhǎng)度大于這個(gè)細(xì)胞胞體直徑的2倍時(shí)，我們一般認(rèn)為此細(xì)胞屬于已分化細(xì)胞。分別對(duì)培養(yǎng)12h、24h、48h、72h的DRG細(xì)胞統(tǒng)計(jì)分析分化率和突起長(zhǎng)度，結(jié)果如圖1所示。從圖1(A)可知，在12-72h的分化率沒有顯著差異，說明在72h內(nèi)，L和D型多聚賴氨酸對(duì)DRG細(xì)胞的分化率的影響無顯著差異，而從圖1(B)可知，培養(yǎng)至48h時(shí)DRG的平均突起長(zhǎng)度有明顯差異（進(jìn)行t檢驗(yàn)可得P值小于0.01）。因此，我們可以認(rèn)為，L型多聚賴氨酸在細(xì)胞成長(zhǎng)48h時(shí)對(duì)細(xì)胞的突起長(zhǎng)度有一定的促進(jìn)作用。2.2不同濃度梯度L、D型多聚賴氨酸對(duì)DRG生長(zhǎng)分化的影

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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