背景與目的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSC）是干細(xì)胞家族的重要成員。BMSC具有多向分化潛能，特定的誘導(dǎo)條件下BMSC在體內(nèi)或體外，可分化為骨、軟骨、脂肪、韌帶、肌腱、肌肉、肝、心肌、內(nèi)皮、甚至神經(jīng)等多種組織細(xì)胞。BMSC定向分化的研究已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)，日益受到人們的關(guān)注。微小RNA（microRNA, miRNA）是具有調(diào)控功能的非編碼RNA，其大小長約20-25個核苷酸，廣泛存在于真核生物中并能通過與靶標(biāo)基因的mRNA上的3′端非編碼區(qū)特異結(jié)合配對來調(diào)節(jié)靶標(biāo)基因的翻譯或者保持其穩(wěn)定性。有研究證實microRNA分子在轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平參與控制骨髓基質(zhì)干細(xì)胞多種基因的時空表達(dá)差異；發(fā)現(xiàn)miR-128高水平表達(dá)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。有研究表明Wnt信號傳導(dǎo)途徑參與激活骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞的定向分化。我們利用生物信息學(xué)軟件分析，推測Wnt3a是microRNA-128的靶基因，microRNA-128可能通過調(diào)控Wnt3a影響骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞的定向分化。因此，本實驗通過兩個部分來探討MicroRNA-128對大鼠骨髓... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

大鼠BMSCs細(xì)胞表面標(biāo)志的表達(dá)A:CD29，陽性率99.26%，B:CD44，陽性率99.14%，C:CD105，陽性率98.45%，D:CD34，陽性率1.58%，E:CD45，,陽性率1.82%，

圖 1-13 各組細(xì)胞 Wnta3 mRNA 表達(dá)水平比較rn-blot 檢測結(jié)果樣細(xì)胞標(biāo)志蛋白結(jié)果檢測結(jié)果: 空白對照組、誘導(dǎo)組、類組細(xì)胞神經(jīng)元樣細(xì)胞標(biāo)志蛋白結(jié)果檢測結(jié)果見圖 1-14。7 胞標(biāo) 志蛋白β3-tubulin, MAP-2, NF-M, NSE, GFAP, tin 在未誘導(dǎo)、未轉(zhuǎn)染的空白組大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中出現(xiàn)。而加人 bFGF 和 EGF 誘導(dǎo)的誘導(dǎo)組、類似物組和抑同程度的出現(xiàn)β3-tubulin, MAP-2, NF-M, NSE, GFAP,tin 的印跡；其中類似物組細(xì)胞β3-tubulin, MAP-2, NF Nestin, Vimentin 的印跡均顯著弱于誘導(dǎo)組細(xì)胞，同時3-tubulin, MAP-2, NF-M, NSE, GFAP, Nestin, Vimenti強(qiáng)于誘導(dǎo)組細(xì)胞。說明①bFGF 和 EGF 誘導(dǎo)大鼠骨髓間充

1-14 各組細(xì)胞神經(jīng)元樣細(xì)胞標(biāo)志蛋白免疫印跡檢測結(jié)果：空白對照組、誘導(dǎo)組、類似物結(jié)果檢測結(jié)果見圖 1-15。在四組細(xì)胞中均有現(xiàn)，其中未誘導(dǎo)的空白組大鼠骨髓間充質(zhì)淺；然后是誘導(dǎo)組, 誘導(dǎo)組，抑制劑組依次；抑制劑組細(xì)胞 Wnt3a 蛋白印跡最深。印跡致。說明轉(zhuǎn)染 miR-128 mimics 上調(diào) miR-1表達(dá)，轉(zhuǎn)染 miR-128 Inhibitor 下調(diào) miR-1表達(dá)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化:Wnt3a信號分子的誘導(dǎo)作用[J]. 閻文柱,秦書儉,劉學(xué)政,李德華.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(14)



本文編號：2899436