細胞培養(yǎng)是生物醫(yī)學等相關研究領域的關鍵技術，目前，細胞培養(yǎng)技術局限于靜態(tài)培養(yǎng)，培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等培養(yǎng)環(huán)境被廣泛應用。然而，在正常生理條件下，一些細胞往往處在復雜的力學環(huán)境當中，其中比較典型的是骨細胞、心肌細胞以及血管內(nèi)皮細胞等。由于這些細胞的生長環(huán)境，往往處在一個動態(tài)的環(huán)境當中，細胞生長過程，會受到一些外界機械力的刺激。所以，建立一個動態(tài)的細胞培養(yǎng)環(huán)境，具有非常重要的意義。微流控芯片技術，是近些年發(fā)展起來一門多元化技術。近年來較流行的芯片制作材料PDMS（聚二甲基硅氧烷，Polydimethylsiloxane）具有良好的光學通透性和透氣性等優(yōu)勢，利用PDMS制作的微流控芯片，也被廣泛的應用到細胞培養(yǎng)中。由于PDMS還具有較好的彈性，作為貼壁生長細胞的基底材料，可以為細胞提供具有機械力加載的生長環(huán)境。本文開發(fā)研制了一種三層的PDMS微流控芯片，包括細胞生長層、薄膜形變層以及微通道控制層，選用血管內(nèi)皮細胞（EA.hy926）作為研究對象，實現(xiàn)了對血管內(nèi)皮細胞施加機械拉伸力的刺激。設計制作的多支流通道，滿足了實驗中，可以同時進行不同應變加載要求。本文設計的圓形細胞生長小室，可以經(jīng)過數(shù)學計算，... 

【文章來源】：沈陽工業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 研究背景及研究意義
        1.1.1 細胞動力學
        1.1.2 微流控芯片
    1.2 本研究國內(nèi)外現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢
    1.3 微流控芯片的應用領域總結
    1.4 本文內(nèi)容
第二章 芯片的設計和參數(shù)
    2.1 機械拉伸芯片的原理
        2.1.1 聚二甲基硅氧烷的性能
        2.1.2 拉伸芯片的結構設計
    2.2 芯片參數(shù)的計算
        2.2.1 裝置參數(shù)模型的建立
        2.2.2 流量與應變公式推導
第三章 機械拉伸芯片的制作
    3.1 光刻掩膜的制作
        3.1.1 儀器與材料試劑
        3.1.2 具體操作步驟
        3.1.3 制作經(jīng)驗及重點注意事項
    3.2 二次固化法制作三層 PDMS 芯片
        3.2.1 儀器與材料試劑
        3.2.2 具體操作步驟及注意事項
第四章 芯片上細胞培養(yǎng)實驗
    4.1 實驗設計
    4.2 實驗方法
        4.2.1 顯微拍照直接觀察法
        4.2.2 MTT 法
        4.2.3 熒光染色法
    4.3 微流控芯片細胞培養(yǎng)實驗
        4.3.1 實驗儀器與試劑材料
        4.3.2 實驗步驟
        4.3.3 預實驗：PDMS 與 96 孔板細胞培養(yǎng)對照
    4.4 細胞拉伸實驗及結果
        4.4.1 EA.hy926 在不同作用時間下的活性對照
        4.4.2 EA.hy926 在不同應變下的活性對照
第五章 結論
    5.1 本文結論
    5.2 課題展望
參考文獻
附錄 A SU-82035 光刻膠參數(shù)說明
附錄 B TS-2A 四通道注射泵參數(shù)
附錄 C 實驗藥品的配制
在學研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]微流控芯片細胞實驗室[J]. 秦建華,劉婷姣,林炳承.  色譜. 2009(05)
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博士論文
[1]周期性機械拉伸下人肺上皮細胞生物學效應的研究[D]. 張惠靜.重慶大學 2002
[2]周期性機械拉伸對大鼠成骨細胞生理活性和力學性質的影響[D]. 唐麗靈.重慶大學 2002

碩士論文
[1]拉伸應變對破骨細胞凋亡的影響及其作用機制的研究[D]. 郝慶新.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2012
[2]機械應力影響鼠骨髓基質細胞OPG/RANKLmRNA表達變化的研究[D]. 張曉聰.浙江大學 2007
[3]流體剪切力影響人骨髓間充質干細胞增殖與成骨分化的實驗研究[D]. 李洪鵬.第三軍醫(yī)大學 2005



本文編號：2897471