溫度和時間對臨床應用間充質(zhì)干細胞長距離運輸?shù)挠绊?/H1>
發(fā)布時間：2020-11-10 05:40
間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cell, MSC)具有多向分化潛能和免疫調(diào)節(jié)能力,而且沒有免疫原性,在臨床上應用廣泛,可以用于同種異體治療多種自身免疫性疾病和組織修復等。但是干細胞的長距離運輸和保存問題給間充質(zhì)干細胞的廣泛應用帶來了一定的困難。目前,運輸過程中時間和溫度對干細胞存活率的影響不是十分明確。本實驗以6組第4代骨髓間充質(zhì)干細胞為例,采集細胞清洗后重懸于密封的生理鹽水瓶中,可以直接用于臨床注射。對注射前的細胞進行細胞表面標記和分化潛能鑒定,同時檢測0℃、4℃、冰盒環(huán)境(8℃-17℃)、常溫和37℃等不同的環(huán)境溫度下干細胞隨著時間的延長存活率的變化。實驗結(jié)果顯示,在設(shè)置溫度為4℃的小型車載冰箱中運輸?shù)母杉毎麪顟B(tài)保存最好,在6小時內(nèi)細胞存活率可以保持在90%以上,在保溫箱中放置冰袋(8℃-17℃)保存的效果次之,在2小時內(nèi)細胞存活率可以保持在90%以上。因此,推薦在超過2小時并保持在6小時內(nèi)的長距離運輸過程中,用4℃恒溫小型冰箱保持干細胞的活性。如果運輸時間超過6小時,不建議進行遠距離運輸,應該選擇更快捷的交通工具,讓運輸過程保持在6小時內(nèi)。
【部分圖文】：
No.5rollupNo.28Issue,October2019292019年10月第5卷第28期智慧健康SmartHealthcare圖1人骨髓MSCP0代細胞圖2人骨髓MSCP4代細胞2.2人骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定將6個MSC的第4代細胞進行細胞表面標記抗原流式鑒定，所有細胞CD73,CD90和CD105陽性表達達到95%以上，CD14,CD34,CD45,HLA-DR皆幾乎不表達，表達率在0-1%，圖3所示為其中一個MSC細胞表面標記抗原的表達情況。6個細胞皆可以進行成骨、成脂和成軟骨分化，圖4中a，b和c分別顯示成骨、成脂和成軟骨分化陽性的圖示。圖3人骨髓MSC細胞表面標記抗原表達情況圖4人骨髓MSC成骨、成脂和成軟骨分化鑒定2.3時間溫度對生理鹽水中骨髓間充質(zhì)干細胞的影響將6個4代的人MSC分別分成5份裝入100mL密封生理鹽水袋中，分別放入盛冰水混合物的保溫盒（0℃）、4℃恒溫車載小型冰箱、裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）、常溫保溫盒（25℃左右）和37℃恒溫培養(yǎng)箱（對照）。將上述30份細胞分別在6個時間點（0h,2h,4h,6h,8h和24h）用無菌1mL注射器抽取少量細胞進行存活率檢測。發(fā)現(xiàn)只有4℃恒溫保存的細胞保持存活率在90%上的時間最長，可以達到6小時，其次是放入裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）的細胞，可以達到2小時（表1）。繪制成折線圖后發(fā)現(xiàn)4℃恒溫保存的方法細胞存活率在每個時間點都最高（圖5）。圖5時間和溫度對人骨髓MSC存活率的影響注：a.臺盼藍染色法檢測人骨髓MSC的細胞活性，活細胞染色顯示細胞膜周圍為藍色，細胞內(nèi)部為白色;死細胞細胞膜破損，染料進入?
tober2019292019年10月第5卷第28期智慧健康SmartHealthcare圖1人骨髓MSCP0代細胞圖2人骨髓MSCP4代細胞2.2人骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定將6個MSC的第4代細胞進行細胞表面標記抗原流式鑒定，所有細胞CD73,CD90和CD105陽性表達達到95%以上，CD14,CD34,CD45,HLA-DR皆幾乎不表達，表達率在0-1%，圖3所示為其中一個MSC細胞表面標記抗原的表達情況。6個細胞皆可以進行成骨、成脂和成軟骨分化，圖4中a，b和c分別顯示成骨、成脂和成軟骨分化陽性的圖示。圖3人骨髓MSC細胞表面標記抗原表達情況圖4人骨髓MSC成骨、成脂和成軟骨分化鑒定2.3時間溫度對生理鹽水中骨髓間充質(zhì)干細胞的影響將6個4代的人MSC分別分成5份裝入100mL密封生理鹽水袋中，分別放入盛冰水混合物的保溫盒（0℃）、4℃恒溫車載小型冰箱、裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）、常溫保溫盒（25℃左右）和37℃恒溫培養(yǎng)箱（對照）。將上述30份細胞分別在6個時間點（0h,2h,4h,6h,8h和24h）用無菌1mL注射器抽取少量細胞進行存活率檢測。發(fā)現(xiàn)只有4℃恒溫保存的細胞保持存活率在90%上的時間最長，可以達到6小時，其次是放入裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）的細胞，可以達到2小時（表1）。繪制成折線圖后發(fā)現(xiàn)4℃恒溫保存的方法細胞存活率在每個時間點都最高（圖5）。圖5時間和溫度對人骨髓MSC存活率的影響注：a.臺盼藍染色法檢測人骨髓MSC的細胞活性，活細胞染色顯示細胞膜周圍為藍色，細胞內(nèi)部為白色;死細胞細胞膜破損，染料進入細胞內(nèi)部，染色顯示整個細
智慧健康SmartHealthcare圖1人骨髓MSCP0代細胞圖2人骨髓MSCP4代細胞2.2人骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定將6個MSC的第4代細胞進行細胞表面標記抗原流式鑒定，所有細胞CD73,CD90和CD105陽性表達達到95%以上，CD14,CD34,CD45,HLA-DR皆幾乎不表達，表達率在0-1%，圖3所示為其中一個MSC細胞表面標記抗原的表達情況。6個細胞皆可以進行成骨、成脂和成軟骨分化，圖4中a，b和c分別顯示成骨、成脂和成軟骨分化陽性的圖示。圖3人骨髓MSC細胞表面標記抗原表達情況圖4人骨髓MSC成骨、成脂和成軟骨分化鑒定2.3時間溫度對生理鹽水中骨髓間充質(zhì)干細胞的影響將6個4代的人MSC分別分成5份裝入100mL密封生理鹽水袋中，分別放入盛冰水混合物的保溫盒（0℃）、4℃恒溫車載小型冰箱、裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）、常溫保溫盒（25℃左右）和37℃恒溫培養(yǎng)箱（對照）。將上述30份細胞分別在6個時間點（0h,2h,4h,6h,8h和24h）用無菌1mL注射器抽取少量細胞進行存活率檢測。發(fā)現(xiàn)只有4℃恒溫保存的細胞保持存活率在90%上的時間最長，可以達到6小時，其次是放入裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）的細胞，可以達到2小時（表1）。繪制成折線圖后發(fā)現(xiàn)4℃恒溫保存的方法細胞存活率在每個時間點都最高（圖5）。圖5時間和溫度對人骨髓MSC存活率的影響注：a.臺盼藍染色法檢測人骨髓MSC的細胞活性，活細胞染色顯示細胞膜周圍為藍色，細胞內(nèi)部為白色;死細胞細胞膜破損，染料進入細胞內(nèi)部，染色顯示整個細胞呈藍色；b.6個人骨髓MSC在5個溫度條?
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本文編號：2877553
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No.5rollupNo.28Issue,October2019292019年10月第5卷第28期智慧健康SmartHealthcare圖1人骨髓MSCP0代細胞圖2人骨髓MSCP4代細胞2.2人骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定將6個MSC的第4代細胞進行細胞表面標記抗原流式鑒定，所有細胞CD73,CD90和CD105陽性表達達到95%以上，CD14,CD34,CD45,HLA-DR皆幾乎不表達，表達率在0-1%，圖3所示為其中一個MSC細胞表面標記抗原的表達情況。6個細胞皆可以進行成骨、成脂和成軟骨分化，圖4中a，b和c分別顯示成骨、成脂和成軟骨分化陽性的圖示。圖3人骨髓MSC細胞表面標記抗原表達情況圖4人骨髓MSC成骨、成脂和成軟骨分化鑒定2.3時間溫度對生理鹽水中骨髓間充質(zhì)干細胞的影響將6個4代的人MSC分別分成5份裝入100mL密封生理鹽水袋中，分別放入盛冰水混合物的保溫盒（0℃）、4℃恒溫車載小型冰箱、裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）、常溫保溫盒（25℃左右）和37℃恒溫培養(yǎng)箱（對照）。將上述30份細胞分別在6個時間點（0h,2h,4h,6h,8h和24h）用無菌1mL注射器抽取少量細胞進行存活率檢測。發(fā)現(xiàn)只有4℃恒溫保存的細胞保持存活率在90%上的時間最長，可以達到6小時，其次是放入裝有預先冷凍冰袋的保溫盒（8-17℃）的細胞，可以達到2小時（表1）。繪制成折線圖后發(fā)現(xiàn)4℃恒溫保存的方法細胞存活率在每個時間點都最高（圖5）。圖5時間和溫度對人骨髓MSC存活率的影響注：a.臺盼藍染色法檢測人骨髓MSC的細胞活性，活細胞染色顯示細胞膜周圍為藍色，細胞內(nèi)部為白色;死細胞細胞膜破損，染料進入?
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8 賴秀藍;馬廉;;間充質(zhì)干細胞的臨床應用及產(chǎn)業(yè)化前景[J];中國小兒血液與腫瘤雜志;2016年06期
9 陶一昕;馬鋼;;皮膚間充質(zhì)干細胞的研究進展[J];中國科學:生命科學;2017年04期
10 劉聰;張墨;Hong-Long Ji;;間充質(zhì)干細胞的惡性轉(zhuǎn)化研究進展[J];中華細胞與干細胞雜志(電子版);2017年04期
相關(guān)博士學位論文 前10條
1 李成林;人誘導多能干細胞來源的間充質(zhì)干細胞調(diào)控小鼠免疫反應的機制研究[D];廈門大學;2015年
2 浦雯雯;人小涎腺間充質(zhì)干細胞體外快速成肝誘導相關(guān)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2018年
3 朱永朝;人胎盤來源間充質(zhì)干細胞細胞特性及其生物學功能的研究[D];寧夏大學;2015年
4 龐全海;山羊骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及體外分化潛能的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2005年
5 鄭宗梅;脂肪間充質(zhì)干細胞作為骨組織工程種子細胞的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年
6 屈長青;豬脂肪間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及體外誘導分化研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2006年
7 侯克東;人臍帶Wharton膠中間充質(zhì)干細胞生物學特性及組織工程軟骨體外構(gòu)建的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2008年
8 趙貴芳;臍帶間充質(zhì)干細胞及其來源外泌體修復皮膚損傷的機制研究[D];吉林大學;2016年
9 曹寧;人臍帶間充質(zhì)干細胞干預衰老相關(guān)認知功能下降的作用及機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2017年
10 王俊國;hBMP-2基因轉(zhuǎn)染人臍血間充質(zhì)干細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞的研究[D];山東大學;2014年
相關(guān)碩士學位論文 前10條
1 劉書婷;MiR-26b靶向ROCK1調(diào)控間充質(zhì)干細胞遷移的機制研究[D];蘇州大學;2018年
2 尋成峰;人嗅黏膜間充質(zhì)干細胞來源外泌體分離鑒定及蛋白質(zhì)組學研究[D];湖南師范大學;2019年
3 廖云鵬;Wnt10b與BMP9誘導間充質(zhì)干細胞骨向分化的關(guān)系研究[D];重慶醫(yī)科大學;2019年
4 朱茄慧;Wnt11促進BMP9誘導間充質(zhì)干細胞骨向分化與TGF-β1的關(guān)系研究[D];重慶醫(yī)科大學;2019年
5 林瑤;間充質(zhì)干細胞來源的外泌體改善骨髓間充質(zhì)干細胞體外衰老的初步研究[D];深圳大學;2018年
6 陸夢婷;Pax2通過Runx2促進小鼠間充質(zhì)干細胞的增殖及成骨向分化[D];南京醫(yī)科大學;2019年
7 郭曉華;兔源間充質(zhì)干細胞特異核酸適配體的篩選與鑒定[D];廣西醫(yī)科大學;2017年
8 楊燕;磁場控制組裝對SD大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞攝取γ-Fe_2O_3納米顆粒的影響研究[D];東南大學;2017年
9 王昊;CXCL12對人嗅黏膜間充質(zhì)干細胞遷移能力、干性及免疫調(diào)節(jié)的影響[D];湖南師范大學;2018年
10 鄔楊楠;真皮間充質(zhì)干細胞和心臟間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)及生物學特性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2018年
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