背景:以往研究發(fā)現(xiàn),臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體具有促進(jìn)犬皮膚傷口愈合的作用,但犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)血管再生的作用機(jī)制尚未明確。目的:探討犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及凋亡能力的影響及其機(jī)制。方法:采用低溫超高速離心法分離犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體;采用血管內(nèi)皮機(jī)械剝離和Ⅰ型膠原酶消化法分離犬血管內(nèi)皮細(xì)胞并通過(guò)表面標(biāo)記和分化特性對(duì)其進(jìn)行鑒定。使用CCK-8法、劃痕實(shí)驗(yàn)和Annexin V流式檢測(cè)法測(cè)定犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響,高通量測(cè)序檢測(cè)犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體中miRNA的表達(dá)并探討其可能性機(jī)制。結(jié)果與結(jié)論:實(shí)驗(yàn)成功建立了犬動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離與培養(yǎng)方法,其形態(tài)呈鋪路石狀,陽(yáng)性表達(dá)CD34和CD31表面蛋白;犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體能顯著促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與遷移,抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,而其作用機(jī)制可能是其中富含豐富的miRNA。
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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
        1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與樣品采集
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)和鑒定
        1.4.2血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)和鑒定
        1.4.3 外泌體的分離和鑒定
        1.4.4 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
        1.4.5 不同濃度犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響
        1.4.6 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的影響
        1.4.7 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響
        1.4.8犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體miRNA測(cè)序
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 犬血管內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定結(jié)果
    2.2 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體分離和鑒定結(jié)果
    2.3 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響
    2.4 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的影響
    2.5 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響
    2.6 犬臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體測(cè)序結(jié)果
3 討論Discussion

【參考文獻(xiàn)】

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