背景:以往研究發(fā)現(xiàn),臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體具有促進犬皮膚傷口愈合的作用,但犬臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體對血管再生的作用機制尚未明確。目的:探討犬臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體對血管內(nèi)皮細胞增殖、遷移及凋亡能力的影響及其機制。方法:采用低溫超高速離心法分離犬臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體;采用血管內(nèi)皮機械剝離和Ⅰ型膠原酶消化法分離犬血管內(nèi)皮細胞并通過表面標記和分化特性對其進行鑒定。使用CCK-8法、劃痕實驗和Annexin V流式檢測法測定犬臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體對血管內(nèi)皮細胞增殖、遷移和凋亡的影響,高通量測序檢測犬臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體中miRNA的表達并探討其可能性機制。結(jié)果與結(jié)論:實驗成功建立了犬動脈血管內(nèi)皮細胞的分離與培養(yǎng)方法,其形態(tài)呈鋪路石狀,陽性表達CD34和CD31表面蛋白;犬臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體能顯著促進血管內(nèi)皮細胞增殖與遷移,抑制內(nèi)皮細胞凋亡,而其作用機制可能是其中富含豐富的miRNA。
【文章目錄】：
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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗動物與樣品采集
        1.3.2 實驗試劑和儀器
    1.4 實驗方法
        1.4.1 犬臍帶間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)和鑒定
        1.4.2血管內(nèi)皮細胞原代培養(yǎng)和鑒定
        1.4.3 外泌體的分離和鑒定
        1.4.4 犬臍帶間充質(zhì)干細胞與血管內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)實驗
        1.4.5 不同濃度犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體對血管內(nèi)皮細胞增殖的影響
        1.4.6 犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體對血管內(nèi)皮細胞遷移的影響
        1.4.7 犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體對血管內(nèi)皮細胞凋亡的影響
        1.4.8犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體miRNA測序
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果Results
    2.1 犬血管內(nèi)皮細胞的原代培養(yǎng)和鑒定結(jié)果
    2.2 犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體分離和鑒定結(jié)果
    2.3 犬臍帶間充質(zhì)干細胞和臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體對血管內(nèi)皮細胞增殖的影響
    2.4 犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體對血管內(nèi)皮細胞遷移的影響
    2.5 犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體對血管內(nèi)皮細胞凋亡的影響
    2.6 犬臍帶間充質(zhì)干細胞外泌體測序結(jié)果
3 討論Discussion

【參考文獻】

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本文編號：2861526