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iNKT細(xì)胞聯(lián)合卵清蛋白對(duì)髓源性樹突狀細(xì)胞表型和功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-10-25 22:52
   目的:觀察哮喘小鼠恒定自然殺傷T細(xì)胞(iNKT細(xì)胞)聯(lián)合卵清蛋白(OVA)對(duì)髓源性樹突狀細(xì)胞(BMDCs)表型和功能的影響。方法:取健康雄性野生型BLAB/c小鼠BMDCs,分別與哮喘小鼠脾臟iNKT細(xì)胞聯(lián)合OVA(iNKT細(xì)胞聯(lián)合OVA組)、脂多糖(LPS組)、iNKT細(xì)胞聯(lián)合PBS(iNKT細(xì)胞聯(lián)合PBS組)、OVA(OVA組)或PBS(PBS組)共培養(yǎng)20 h,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組BMDCs表面分子MHC-II、CD80、CD86和CD40的表達(dá)水平,ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清液中白細(xì)胞介素12(IL-12)p70、IL-6、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和IL-10的水平;取各組共培養(yǎng)后的BMDCs,與DO11.10轉(zhuǎn)基因小鼠脾CD4~+ T細(xì)胞共培養(yǎng)48 h,采用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清液中IL-4和干擾素γ(IFN-γ)的水平。結(jié)果:iNKT細(xì)胞聯(lián)合OVA組BMDCs表面分子MHC-II、CD80、CD86和CD40及培養(yǎng)上清液IL-12 p70、IL-6和TNF-α水平與LPS組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05),但明顯高于iNKT細(xì)胞聯(lián)合PBS組、OVA組和PBS組(P0.05或P0.01);iNKT細(xì)胞聯(lián)合OVA組BMDCs與DO11.10 CD4~+ T細(xì)胞共培養(yǎng)上清液IL-4水平與LPS組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P0.05),但明顯高于iNKT細(xì)胞聯(lián)合PBS組、OVA組和PBS組(P0.01)。結(jié)論:存在OVA時(shí),iNKT細(xì)胞可以誘導(dǎo)BMDCs表型和功能的免疫原性成熟。
【部分圖文】:

共培養(yǎng),表達(dá)水平,細(xì)胞,上清液


Figure2.TheexpressionofMHCII,CD80,CD86andCD40onBMDCs(CD11c+F4/80-cells)fromdifferentBMDCspecimens.BMDCs:bonemarrow-deriveddendriticcells.ThepercentagesonthehorizontallinesrepresentpercentagesofMHC-II+,CD40+,CD86+andCD80+BMDCsinBMDCs.圖2各組共培養(yǎng)后BMDCs表面分子表達(dá)水平的比較表1各組共培養(yǎng)后BMDCs表面分子表達(dá)水平的比較Table1.TheexpressionofMHC-II,CD80,CD86andCD40onBMDCs(CD11c+F4/80-cells)indifferentBMDCspecimens(%.Mean±SD.n=6)GroupMHC-II+/BMDCsCD80+/BMDCsCD86+/BMDCsCD40+/BMDCsPBS62.6±15.831.9±7.723.2±4.141.0±11.6OVA63.6±16.530.7±7.522.9±4.838.4±10.2LPS94.2±20.1△△**88.8±18.6△△**93.2±21.5△△**89.6±18.3△△**iNKTcellsplusPBS80.3±19.4△△62.6±14.5△△74.2±16.7△△59.4±12.8△△iNKTcellsplusOVA90.3±21.2△△*85.5±19.2△△**88.4±20.5△△**82.3±20.1△△**BMDCs:bonemarrow-deriveddendriticcells.△△P<0.01vsPBSandOVAgroup;*P<0.05,**P<0.01vsiNKTcellsplusPBSgroup.3各組BMDCs共培養(yǎng)上清液細(xì)胞因子水平的比較以BMDCs體外培養(yǎng)上清液IL-12p70、IL-6、TNF-α和IL-10的水平表示BMDCs處于功能成熟水平[6]。iNKT細(xì)胞聯(lián)合OVA組BMDCs培養(yǎng)上清液的IL-12p70、IL-6和TNF-α水平與LPS組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P>0.05),但明顯高于iNKT細(xì)胞聯(lián)合PBS組、OVA組和PBS組(P<0.01),見表2。iNKT細(xì)胞聯(lián)合PBS組BMDCs培養(yǎng)上清液IL-10水平明顯高于iNKT細(xì)胞聯(lián)合OVA組和LPS組(P<
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