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一個人類α甘露糖苷酶全長cDNA的克

發(fā)布時間:2020-10-22 23:06
   機(jī)體的蛋白質(zhì)大多以糖復(fù)合物的形式存在,而糖蛋白中的聚糖不但與蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能密切相關(guān),而且本身也有著重要的生物學(xué)意義,因此成為繼蛋白質(zhì)和核酸之后又一生命科學(xué)的重要研究領(lǐng)域。盡管因?yàn)榫厶墙Y(jié)構(gòu)十分復(fù)雜,使其結(jié)構(gòu)和功能的研究困難重重,但近年來,隨著分子生物學(xué)知識和技術(shù)的滲入,極大地促進(jìn)了糖蛋白聚糖結(jié)構(gòu)和功能的研究。 α-甘露糖苷酶作為一種重要的糖加工酶,參與N-聚糖的加工成熟。為了研究其在聚糖生物合成中的作用,學(xué)者們已先后從酵母和多種哺乳動物細(xì)胞中克隆出了十多個不同的α-甘露糖苷酶的基因。本實(shí)驗(yàn)室也于數(shù)年前用抗人活化B淋巴細(xì)胞株3D5細(xì)胞的單克隆抗體6A8,自一個人扁桃體細(xì)胞λgt11 cDNA文庫中篩選到了一個長1358bp的cDNA克隆,內(nèi)含一個編碼425個氨基酸的開放閱讀框架。從此框架核苷酸序列推斷的氨基酸序列與一個大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶氨基酸序列的后二分之一高度同源。在1995年我們已向GenBank登記了這個cDNA序列,稱之為6A8 cDNA。但是它的ORF起始密碼子前沒有終止密碼子。為了確定其是否為全長cDNA,我們進(jìn)行了人多種組織中6A8 mRNANorthern blot檢測。結(jié)果表明6A8有兩個轉(zhuǎn)錄本形式,一為±4.3kb,另一為±3.5kb。這表明1358bp cDNA非為全長cDNA。 以1358 bp cDNA作探針,從一個新購買的人扁桃體細(xì)胞λgt11 cDNA文庫(ATCC No.37546)作Southern blot,篩選到了兩個陽性克隆,克隆1和克隆2,長度分別為±2.1kb和±1.6kb,克隆1與1358 bp cDNA的5′端有594bp的重疊,
【學(xué)位單位】:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:1999
【中圖分類】:R346
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
編寫索引
前言
材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
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【共引文獻(xiàn)】

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1 張立新;一個新的與大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α甘露糖苷酶高度同源的人B淋巴細(xì)胞分化抗原的cDNA克隆與鑒定[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年



本文編號:2852204

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