【摘要】：【背景】隨著抗生素的廣泛使用甚至濫用,細(xì)菌耐藥性問(wèn)題日益顯著,利用噬菌體治療耐藥致病菌的方法重新開(kāi)始被人們關(guān)注�！灸康摹繉�(duì)一株烈性肺炎克雷伯菌噬菌體vB_KpnP_IME279進(jìn)行生物學(xué)特性研究及生物信息學(xué)分析�！痉椒ā恳砸恢甓嘀啬退幍姆窝卓死撞鸀樗拗骶�,從醫(yī)院污水中分離噬菌體,應(yīng)用雙層平板法檢測(cè)噬菌體效價(jià)、最佳感染復(fù)數(shù)(Optimal MOI)、一步生長(zhǎng)曲線以及裂解譜,純化后通過(guò)透射電鏡觀察噬菌體形態(tài);應(yīng)用蛋白酶K/SDS法提取噬菌體全基因組,使用Illumina MiSeq測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行噬菌體全基因組測(cè)序,測(cè)序后對(duì)噬菌體全基因組序列進(jìn)行組裝、注釋、進(jìn)化和比較基因組學(xué)分析�！窘Y(jié)果】分離到一株新的肺炎克雷伯菌噬菌體,命名為vB_KpnP_IME279;其最佳感染復(fù)數(shù)為0.1,一步生長(zhǎng)曲線顯示潛伏期為20 min,平均裂解量140 PFU/cell,電鏡觀察顯示該噬菌體屬于短尾噬菌體科(Podoviridae)�；蚪M測(cè)序表明,噬菌體基因組全長(zhǎng)為42 518 bp,(G+C)mol%含量為59.3%。BLASTn比對(duì)結(jié)果表明,該噬菌體與目前已知噬菌體的相似性較低,基因組僅70%區(qū)域與已知噬菌體有同源性。構(gòu)建噬菌體主要衣殼蛋白的基因進(jìn)化樹(shù),分析了噬菌體IME279與其他短尾科噬菌體的進(jìn)化關(guān)系,結(jié)果表明該噬菌體是短尾科噬菌體的一名新成員�！窘Y(jié)論】分離鑒定了一株新的肺炎克雷伯菌噬菌體,進(jìn)行了生物學(xué)特性、全基因組測(cè)序和生物信息學(xué)分析,為研究肺炎克雷伯菌噬菌體與宿主之間的相互作用關(guān)系以及治療多重耐藥細(xì)菌感染奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】：

結(jié)果如圖2所示，當(dāng)MOI為0.1時(shí)，噬菌體感染宿主后釋放的子代噬菌體的數(shù)量最多，即噬菌體vB＿KpnP＿IME279的最佳感染復(fù)數(shù)為0.1。圖2 最佳感染復(fù)數(shù)的測(cè)定結(jié)果

最佳感染復(fù)數(shù)的測(cè)定結(jié)果

通過(guò)對(duì)共計(jì)20株肺炎克雷伯菌的雙層板點(diǎn)板實(shí)驗(yàn)表明，該噬菌體對(duì)其中10株有裂解能力，結(jié)果如表2所示。2.6 噬菌體vB＿KpnP＿IME279全基因組分析概述
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2843382