本研究旨在探討富含甘油三酯的脂蛋白(triglyceride-rich lipoproteins,TRLs)中載脂蛋白CⅢ(apolipoprotein CⅢ,ApoCⅢ)的高表達對人腎小球系膜細胞(human mesangial cells,HMCs)表型轉(zhuǎn)分化的作用及其機制。從正常野生型小鼠(WT)及ApoCⅢ轉(zhuǎn)基因小鼠血漿中提取TRLs,在體外培養(yǎng)的HMCs中分別給予相同甘油三酯濃度的正常TRLs(TRL-WT),或富含ApoCⅢ的TRLs(TRL-CⅢ)孵育12 h。結果顯示,TRL-CⅢ中ApoCⅢ蛋白質(zhì)表達水平約為WT小鼠TRLs的4倍。與陰性對照(NC)組相比,兩種TRLs均可誘導HMCs中轉(zhuǎn)分化標志物α-SMA及纖維化相關因子纖連蛋白、TGF-β1、CTGF、ColⅠ、ColⅣ的mRNA及α-SMA和纖連蛋白的蛋白質(zhì)表達水平升高,且TRL-CⅢ較TRL-WT作用更明顯。TRL-CⅢ組中,α-SMA及纖連蛋白蛋白質(zhì)表達水平分別為TRLWT組的1. 4倍(P0. 05)和2. 1倍(P0. 01)。與NC組相比,兩種TRLs均可引起細胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平增加,且TRL-CⅢ組較TRL-WT組高1. 5倍(P0. 05);氧化應激相關因子Nox4、P22phox、PKC-β的mRNA及Nox4蛋白表達水平在兩組均增高,且TRL-CⅢ較TRL-WT作用更為明顯(P0. 05)。TRL-CⅢ組中,Nox4蛋白表達水平為TRL-WT組的1. 6倍(P 0. 01)。NADPH氧化酶抑制劑apocynin可使TRL-CⅢ引起的細胞內(nèi)ROS水平下降約2倍(P 0. 01)。上述轉(zhuǎn)分化標志物及纖維化相關因子基因及蛋白質(zhì)表達水平均明顯下降。本研究表明,TRLs通過氧化應激通路促進HMCs表型轉(zhuǎn)分化,ApoCⅢ的高表達進一步促進該作用。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動物
    1.2 材料
    1.3 TRLs的提取
    1.4 TRLs中甘油三酯含量的檢測
    1.5 細胞培養(yǎng)
    1.6 Western印跡分析
    1.7 RT-PCR法檢測mRNA的表達
    1.8 活性氧檢測
    1.9 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 ApoCⅢ轉(zhuǎn)基因小鼠的TRLs中ApoCⅢ含量顯著增高
    2.2 ApoCⅢ促進HMCs表型轉(zhuǎn)分化及纖維化
    2.3 ApoCⅢ促進HMCs中氧化應激通路的激活
    2.4 Apocynin可明顯抑制ApoCⅢ引起的HMCs中ROS的產(chǎn)生
    2.5 Apocynin降低ApoCⅢ引起的HMCs表型轉(zhuǎn)分化及纖維化
3 討論

【參考文獻】

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1 吳垣轅;劉東方;;Nox和氧化應激與糖尿病[J];中國生物化學與分子生物學報;2013年01期

【共引文獻】

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3 呂立勛;李唐棣;趙琳琳;趙利剛;吳范武;;自制三清降糖緩釋片對糖尿病兔血糖、血脂及氧化應激的影響[J];西部中醫(yī)藥;2014年09期

【二級參考文獻】

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5 孫陽,鄭法雷,劉彥信,鄭德先,畢增祺;血管緊張素Ⅱ及其1型受體拮抗劑對豬腎小管上皮細胞株LLC-PK1細胞轉(zhuǎn)分化的作用[J];中華內(nèi)科雜志;2000年10期

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9 Wenxiang Hu;Binlong Qiu;Wuqiang Guan;Qinying Wang;Min Wang;Wei Li;Longfei Gao;Lu Shen;Yin Huang;Gangcai Xie;Hanzhi Zhao;Ying Jin;Beisha Tang;Yongchun Yu;趙簡;裴鋼;;化合物雞尾酒法誘導人成纖維細胞向神經(jīng)細胞的直接轉(zhuǎn)分化[J];科學新聞;2016年01期

10 陳瑗，周玫;氧化應激與原核基因表達的調(diào)控[J];生命的化學(中國生物化學會通訊);1994年06期

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本文編號：2843106