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人促血液血管細(xì)胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)單克隆抗體的制備、鑒定及應(yīng)用

發(fā)布時間:2020-10-11 10:37
   人促血液血管細(xì)胞生成素(Hemangiopoietin,HAPO)是我實(shí)驗(yàn)室首次從再障病人尿中提取的一種新的蛋白因子。重組的HAPO具有明顯的促進(jìn)造血和放化療保護(hù)作用。為了更好地進(jìn)行HAPO的基礎(chǔ)理論研究,我們通過雜交瘤方法制備了抗HAPO的單克隆抗體,組建了檢測HAPO含量的ELISA試劑盒,并通過免疫印記對人血清及胎肝中的天然HAPO進(jìn)行了初步鑒定。所篩選的單抗中,三株為IgG1,二株為IgM,其輕鏈均為κ。三株IgG1的相對親和力分別為3.06×10~9M~(-1),6.07×10~8M~(-1)和1.71×10~(10)M~(-1),對抗原表位的識別均為構(gòu)象非依賴性且均可用于冰凍及石蠟切片的免疫組化研究。血清及胎肝中天然HAPO的SDS-PAGE和western blot結(jié)果表明,二者中陽性帶的位置均接近重組的HAPO。ELISA檢測結(jié)果表明:正常成人血清中HAPO的含量為57.27±17.01ng/ml,重再患者血清中HAPO的含量為44.05±32.09ng/ml(P<0.05),慢再為79.32±55.67ng/ml(P<0.01),特發(fā)性血小板減少性紫癜為77.10±34.41ng/ml(P<0.01),淋巴細(xì)胞白血病為60.73±36.81ng/ml(P>0.05),非淋巴細(xì)胞白血病為69.30±40.87ng/ml(P<0.01),骨髓移植患者為42.85±30.00ng/ml(P<0.05),除淋巴細(xì)胞白血病外,均與正常水平有顯著性差異。在非淋巴細(xì)胞白血病患者中,慢性髓細(xì)胞性白血病為65.97±35.20ng/ml,急性髓細(xì)胞性白血病為70.59±43.01ng/ml,其中M2為66.82±32.85ng/ml,M3為84.33±62.26ng/ml,M4為64.58±29.27ng/ml,M5為64.93±29.96ng/ml,
【學(xué)位單位】:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:2004
【中圖分類】:R392
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    單克隆抗體在血液系統(tǒng)惡性疾病中的治療作用
    血管生成/新生調(diào)控及其治療應(yīng)用
英文縮寫
在學(xué)期間發(fā)表論文
致謝

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